Question

【題目】[生物——選修3，現代生物科技專題]利用基因工程可以治療有基因缺陷的疾病。基因缺失小鼠不能產生成熟的淋巴細胞。科研人員利用胚胎干細胞(ES細胞)對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療，其技術流程如下圖：

(1)該項工程中目的基因的獲取可以利用PCR技術，依據_________設計引物，利用_______為原料在PCR儀中進行擴增。

(2)該項基因工程的關鍵環節是需要構建含有Rag2基因的_______________.

(3)圖中步驟①中所選的卵母細胞應處于___________期。而ES細胞一般從發育到________時期的

重組胚胎中分離獲取。

(4)轉化成功的ES細胞具有的結構特點是_______________。為檢測Rag2基因的表達情況，可提取治療后小鼠骨髓細胞的蛋白質，用抗Rag2蛋白的抗體進行________________。

Answer 1

【答案】Rag2基因的核苷酸序列4種脫氧核苷酸表達載體（重組質粒）減數第二次分裂中（MⅡ中）囊胚體積小，細胞核大，核仁明顯，且具有目的基因抗原-抗體雜交

【解析】分析題圖：圖示是利用胚胎干細胞（ES細胞）對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療的過程圖解，其中①表示核移植過程，②表示早期胚胎培養過程，③表示采用基因工程技術將目的基因導入受體細胞。

(1)引物的設計要根據要擴增的DNA序列來設計即Rag2基因的核苷酸序列，利用為4種脫氧核苷酸原料在PCR儀中進行擴增；

(2)該項基因工程的關鍵環節基因表達載體的構建；

(3) 卵母細胞進入輸卵管，并停留在第2次成熟分裂中期，此時染色體都集中在赤道板位置，容易去除染色體，而且此時的細胞才具備受精能力，更容易接收外源染色體，故圖中步驟①中所選的卵母細胞應處于MII期。而ES細胞一般從發育到囊胚時期的重組胚胎中分離獲取。

(4)轉化成功的ES細胞具有的結構特點是體積小，細胞核大，核仁明顯，且具有目的基因。基因表達的產物是蛋白質，可用抗原-抗體雜交技術來鑒定。