Question

【題目】B基因存在于水稻基因組中，僅在體細胞和精子中正常表達，在卵細胞中不轉錄。為研究B基因表達對卵細胞的影響，設計并完成了如下實驗來獲取能夠在卵細胞中表達B基因的轉基因植株。下列關于該實驗的敘述，正確的是（ ）

A.B基因在水稻卵細胞中不轉錄，可能是B基因的啟動子在卵細胞中無法啟動轉錄

B.可利用水稻體細胞和精子中的RNA構建cDNA文庫，從中獲得B基因中編碼蛋白的序列

C.過程②在培養基中應加入卡那霉素以檢測T—DNA是否整合到水稻細胞染色體DNA上

D.在鑒定和篩選轉基因植株時，可以檢測加入熒光素的該植株卵細胞中是否發出熒光

Answer 1

【答案】ABD

【解析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣.將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術.個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

A、啟動子是與RNA聚合酶結合并能起始mRNA合成的序列，所以B基因在水稻卵細胞中不能轉錄，可能是B基因的啟動子在卵細胞中無法啟動轉錄，A正確；

B、目的基因獲取途徑之一就是從cDNA文庫中獲得，B正確；

C、檢測T-DNA是否整合到水稻細胞染色體DNA上，應該用DNA分子雜交法，C錯誤；

D、由于基因表達載體上有Luc基因，其表達的熒光素酶能催化熒光素產生熒光，所以在鑒定和篩選轉基因植株時，可以檢測加入熒光素的該植株卵細胞中是否發出熒光，D正確。

故選ABD。