科目：高中生物 來源：上海市長寧區2012屆高三上學期期末質量抽測生物試題 題型：071
回答有關生物工程的問題。
小鼠是實驗室常用的實驗動物，如：利用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體、利用小鼠進行DNA重組研究中導致了“基因敲除”技術的出現。
用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體。
1．將小鼠等分為兩組，甲組定期間隔注射適量的含X病毒的溶液，其目的是_________；乙組注射_________。
2．一段時間后，取甲組小鼠脾臟中的相應細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合，細胞融合的結構特點是_________。融合形成的雜交瘤細胞特點是_________。
3．為了保存有價值的雜交瘤細胞系，通常用超低溫將其凍存，請分析其原_________。
用小鼠進行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術，能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術的主要過程如下：
第一步：分離小鼠胚胎干細胞，這些細胞中含有需要改造的基因，稱“靶基因”。
第二步：獲取與“靶基因”同源的DNA片斷，利用特定技術在該DNA片段上插入neoR基因（新霉素抗性基因）成為突變DNA（如下圖），使該片段上的靶基因失活。
第三步：將插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因轉移入胚胎干細胞，再通過同源互換，用失活靶基因取代兩個正常靶基因中的一個，完成對胚胎干細胞的基因改造。
第四步：將第三步處理后的胚胎干細胞，轉移到特定培養基中篩選培養。
其基本原理如下圖所示：
4．第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是_________。neoR基因不僅能使靶基因失活，還是_________；“靶基因失活”的含義是_________。
5．從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個靶基因的胚胎干細胞，到將該細胞培育成“基因敲除”小鼠，運用到的生物技術有_________、_________等。
6．科學家可以通過“基因敲除”來研究基因的功能，4題中獲得的基因敲除小鼠，能否直接用來研究基因功能并說明原因_________。
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科目：高中生物 來源： 題型：
35.（7分）棉鈴蟲是一種危害棉花的害蟲。我國科學工作者發現一種生活在棉鈴蟲消化道內的蘇云金桿菌能分泌一種毒蛋白使棉鈴蟲致死，而這種毒蛋白對人畜無害。通過基因工程方法，科學家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉入棉花植株并成功表達，棉鈴蟲吃了這種轉基因棉花的植株后就會死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌發時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進而導入尚不具備細胞壁的合子或早期胚細胞，最終形成含有目的基因的種胚。此種方法的優點是操作簡便，省去了組培的復雜過程。
（1）利用花粉管通道法將毒蛋白基因導入棉花細胞，此過程是基因操作的基本步驟中的第三步，即 。構建基因表達載體時要把目的基因整合到Ti質粒的T-DNA上，其原因是 。
（2）基因工程的工具酶可以將目的基因切下并連接到運載體上。限制酶可以識別特定的DNA序列，并切斷 鍵。下列所示的黏性末端是由 種限制酶作用產生的。
（3）用標記的特異性抗體可以直接檢測毒蛋白，這種檢測方法稱為 。
也可在宏觀性狀水平檢測該目的基因是否表達，方法是 。已知轉基因植物中毒素蛋白只結合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風險相對較小，原因是人類腸上皮細胞 。
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