Question

12．人們預防與診療傳染性疾病經常使用疫苗和抗體，已知禽流感傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，相應疫苗生產和抗體制備的流程之一如圖1所示：
（1）過程②代表基因工程操作步驟中的目的基因的獲取；基因工程的核心步驟是③（填序號），該過程所需的工具酶有限制酶、DNA連接酶．
（2）過程⑦利用的生物學原理是細胞膜的流動性，獲得的X稱為雜交瘤細胞．
（3）對健康人進行該傳染病免疫預防時，可選用圖中基因工程生產的A蛋白制備疫苗．對該傳染病疑似患者確診時，可以從疑似患者體內分離出核酸序列病毒，與已知病毒進行比較，或用圖中的抗A蛋白單克隆抗體進行特異性結合檢測．
如圖2所示為培育轉基因抗蟲棉的技術流程．請據圖回答：
（4）在培育成功的轉基因抗蟲棉的傳種接代過程中，抗蟲基因和標記基因是否遵循基因的自由組合定律．不遵循為什么？抗蟲基因和標記基因不是位于細胞核內的兩對同源染色體上．
（5）過程②采用最多的方法是農桿菌轉化法．在實驗室中，檢測抗蟲基因是否整合到棉花細胞的DNA分子上的方法是DNA分子雜交．
（6）經過③過程形成愈傷組織的細胞分裂方式是有絲分裂．
（7）過程④所表達的兩個重要的生理現象是生長和分化．

Answer 1

分析 根據題意和圖示分析可知：
圖1為疫苗生產和抗體制備的流程之一，其中①表示逆轉錄過程；②是獲取目的基因（A基因）的過程；③是基因表達載體的構建過程；④是將目的基因導入受體細胞的過程；⑤是從小鼠皮下獲取已經免疫的B細胞的過程；⑥表示B細胞的增殖和分化過程；⑦是細胞融合過程；X為雜交瘤細胞；⑧是獲得抗A蛋白單克隆抗體．
圖2中：①是基因表達載體的構建過程，②是將目的基因導入受體細胞的過程，③是脫分化過程，④是再分化過程．
農桿菌特點：易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力；Ti質粒的T-DNA可轉移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上．

解答 解：（1）基因工程的操作步驟是：目的基因的獲取--構建基因表達載體--導入受體細胞--目的基因的檢測和表達．過程②代表的是目的基因的獲取．基因工程的核心步驟是③構建基因表達載體．構建A基因重組載體時，首先需用限制性核酸內切酶切割含有A基因的外源DNA分子和運載體，再用DNA連接酶連接A基因和運載體形成A基因重組載體．
（2）過程⑦采用動物細胞融合技術，應用的原理是細胞膜的流動性，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，獲得的細胞叫雜交瘤細胞，其具備了骨髓瘤細胞無限增殖的特性和效應B細胞產生抗體的特性，從而制備單克隆抗體．
（3）本題中提示該RNA病毒表面的A蛋白為主要的抗原，故而可選用通過基因工程生產的A蛋白制備疫苗；確診時為判斷該病毒是否為題目中的RNA病毒，可以進行核酸序列的比對，也可以利用單克隆抗體具備特異性，利用抗A蛋白的特異性單克隆抗體通過能否特異性結合判斷病毒表面是否有A蛋白的存在進一步進行檢測是否為目的RNA病毒．
（4）在培育成功的轉基因抗蟲棉的傳種接代過程中，由于抗蟲基因和標記基因不是位于細胞核內的兩對同源染色體上，所以抗蟲基因和標記基因的遺傳不遵循基因的自由組合定律．
（5）過程②采用最多的方法是農桿菌轉化法．在實驗室中，檢測抗蟲基因是否整合到棉花細胞的DNA分子上的方法是DNA分子雜交．
（6）植物組織培養過程中，經過③過程形成愈傷組織的細胞分裂方式是有絲分裂．
（7）過程④為再分化，所表達的兩個重要的生理現象是生長和分化．
故答案為：
（1）目的基因的獲取     ③限制酶   DNA連接酶  
（2）細胞膜的流動性    雜交瘤細胞   
（3）A蛋白      核酸序列（或RNA序列）    抗A蛋白單克隆抗體
（4）不遵循        抗蟲基因和標記基因不是位于細胞核內的兩對同源染色體上
（5）農桿菌轉化法     DNA分子雜交
（6）有絲分裂     
（7）生長和分化

點評 本題結合疫苗生產和抗體制備的流程圖，考查基因工程、動物細胞融合技術、單克隆抗體等知識，要求考生識記基因工程的工具及操作步驟，識記單克隆抗體的制備過程，能準確判斷圖中各過程的名稱，再結合所學的知識答題．