Question

【題目】基因工程中最常用運載體是質粒，受體細胞是大腸桿菌。請根據基因工程的有關知識，回答下列問題：

（1）基因的“剪刀”是指__________________，它切割DNA分子后產生的片段，其末端類型有__________________和__________________。

（2）若要在體外短時間內獲得大量目的基因，常采用__________________技術。

（3）基因工程中除質粒外，__________________和__________________也可作為運載體。

（4）基因工程中用原核生物作為受體細胞的優點是____________________________________。

（5）為保證目的基因在大腸桿菌中能夠表達，構建好的重組質粒應含有__________________。

Answer 1

【答案】限制酶??? 粘性末端??? 平末端??? PCR??? 噬菌體??? 動植物病毒??? 繁殖快，多為單細胞，遺傳物質相對較少??? 啟動子、終止子、目的基因???

【解析】

1.基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

2、基因工程的工具：

（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；

（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵；

（3）運載體：常用的運載體：質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒。

（1）限制酶被稱為基因的“剪刀”，它能將雙鏈DNA分子進行切割，不同的限制酶的識別位點不同，切割后產生末端也不同，一般有黏性末端（有堿基暴露）和平末端（無暴露堿基）兩種類型。

（2）若要在體外短時間內獲得大量目的基因，常采用PCR技術，又叫多聚酶鏈式反應。

（3）基因工程的運載體有質粒、噬菌體和動植物病毒，其中質粒最常用。

（4）由于原核細胞繁殖快，多為單細胞，遺傳物質相對較少，因此，原核細胞經常被作為基因工程的受體細胞。

（5）為保證目的基因在大腸桿菌中能夠表達，構建好的重組質粒應含有啟動子、終止子、目的基因，除外還有標記基因和復制原點。