Question

【題目】如圖為某質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tctR為四環素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復制原點．又知植物甲具有極強的耐旱性，其耐旱性與某個基因有關．若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性．已知耐旱基因兩端分別有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在內的多種酶的酶切位點．據圖回答：

（1）獲得耐旱基因常用基因文庫法．理論上，_________________（填基因文庫種類）中含有該生物的全部基因；而_________________（填基因文庫種類）中含有生物的部分基因．將含有耐旱基因的DNA與該質粒表達載體分別用EcoRⅠ酶切，酶切產物用DNA連接酶處理后，兩兩連接的產物有_________種。

（2）將上述連接產物導入無任何抗藥性的宿主細胞后，將這些宿主細胞接種到含四環素的培養基中，能正常生長的宿主細胞所含有的連接產物是___________________________。

（3）目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結合的位點是_______________，其合成的產物是_______________。

（4）在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產生的末端發生任意連接，酶切時應選用的酶是_______________。

（5）假如用得到的二倍體轉基因耐旱植株自交，子代中耐旱植株與不耐旱植株的數量比為3：1時，則可推測該耐旱基因整合到了_______________________（填“同染色體的一條上”或“同染色體的兩條上”）。

Answer 1

【答案】 基因組文庫 cDNA文庫 3（或6） 載體-載體連接物（或質粒-質粒連接物） 啟動子 mRNA EcoRⅠ和BamHⅠ 同染色體的一條上

【解析】試題分析：

（1）基因組文庫中含有該生物的全部基因，cDNA文庫中含有生物的部分基因。將含有耐旱基因的DNA與該質粒表達載體分別用EcoRⅠ酶切，酶切產物用DNA連接酶處理后，兩兩連接的產物有：目的基因-載體連接物、質粒-質粒連接物、目的基因-目的基因連接物（或包括這3種連接順序相反的另三種），故是3（或6）種。

（2）能正常生長的宿主細胞所含有的連接產物是載體-載體連接物（或質粒-質粒連接物），保證了tctR——四環素抗性基因的完整，并能正常表達。

（3）目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結合的位點在DNA上，是啟動子，其合成的產物是mRNA。

（4）在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產生的末端發生任意連接，酶切時應選用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ。

（5）假如用得到的二倍體轉基因耐旱植株自交，子代中耐旱植株與不耐旱植株的數量比為3：1時，則可推測該耐旱基因整合到了同染色體的一條上，相當于一對基因的雜合體自交。