Question

11．番茄在運輸和貯藏過程中，由于過早成熟而易腐爛．應用基因工程技術，通過抑制某種促進果實成熟激素的合成，可使番茄貯藏時間延長，培育成耐貯藏的番茄新品種．這種轉基因番茄已于1993年在美國上市，請回答：
（1）在培育轉基因番茄的操作中，所用的基因的“剪刀”是限制性內切酶，基因的“針線”是DNA連接酶，基因的“運輸工具”是運載體．
（2）基因工程的操作步驟依次是：提取目的基因、目的基因與運載體結合、將目的基因導入受體細胞、目的基因的表達與檢測．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運載體：常用的運載體：質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．

解答 解：（1）基因工程的“剪刀”是限制性內切酶，“針線”是DNA連接酶，“運輸工具”是運載體．
（2）基因工程的操作步驟依次是：提取目的基因、目的基因與運載體結合、將目的基因導入受體細胞、目的基因的表達與檢測．
故答案為：
（1）限制性內切酶　　DNA連接酶　　運載體　
（2）目的基因與運載體結合     將目的基因導入受體細胞     目的基因的表達與檢測

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作步驟及操作工具，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能結合所學的知識準確答題．