Question

回答有關生物工程的問題。（8分）

小鼠是實驗室常用的實驗動物，如：利用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體、利用小鼠進行DNA重組研究中導致了“基因敲除”技術的出現。

用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體。

（1）．將小鼠等分為兩組，甲組定期間隔注射適量的含X病毒的溶液，其目的是____________________；乙組注射________________（作對照）。

（2）．為了保存有價值的雜交瘤細胞系，通常用超低溫將其凍存，請分析其原因____________

___________________。

    用小鼠進行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術，能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術的主要過程如下：

第一步：分離小鼠胚胎干細胞，這些細胞中含有需要改造的基因，稱“靶基因”。

第二步：獲取與“靶基因”同源的DNA片斷，利用特定技術在該DNA片段上插入neo^R基因（新霉素抗性基因）成為突變DNA（如下圖），使該片段上的靶基因失活。

第三步：將插入neo^R基因（新霉素抗性基因）的靶基因轉移入胚胎干細胞，再通過同源互換，用失活靶基因取代兩個正常靶基因中的一個，完成對胚胎干細胞的基因改造。

第四步：將第三步處理后的胚胎干細胞，轉移到特定培養基中篩選培養。

其基本原理如下圖所示：

（3）．第二步中neo^R基因插入靶基因使用的工具酶是                      。neo^R基因不僅能使靶基因失活，還可作為        ；“靶基因失活”的根本原因是             。

（4）．從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個靶基因的胚胎干細胞，到將該細胞培育成“基因敲除”小鼠，運用到的生物技術有            、              等。

 

Answer 1

【答案】

（8分，每空1分）（1）．獲得能產生抗X病毒抗體的B淋巴細胞（漿細胞）    等量不含X病毒的溶液(2)．超低溫抑制酶活性，利于保存其特性(3)．限制酶（限制性核酸內切酶）、DNA連接酶    標記基因    靶基因中的脫氧核苷酸數量序列發生改變，不能正常表達

(4)．克隆技術  轉基因技術（合理給分）

【解析】制備單克隆抗體，需對雜交瘤細胞進行篩選，注入抗原，看是否發生凝集反應，通常實驗要做對照實驗實驗組注入一定量的抗原，對照組注入等量不含抗原的溶液，低溫保存是利用酶在低溫條件下活性被抑制而不變性利于保存其特性。把目的基因插入運載體中通常用限制酶和DNA連接酶，通常一些特殊抗性的基因作為標記基因導入受體細胞內沒有表達掘所需的產品原因通常是靶基因發生基因突變即其中的脫氧核苷酸數量序列發生改變，不能正常表達，基因敲除的胚胎干細胞利用的技術有轉基因技術，動物細胞培養技術，克隆技術，動物胚胎移植技術等。