Question

研究發現：端粒在不同物種細胞中對于保持染色體穩定性和細胞活性有重要作用，端粒酶是一種逆轉錄酶，能延長縮短的端粒（縮短的端粒其細胞復制能力受限），從而增強體外細胞的增殖能力。端粒酶在正常人體組織中的活性被抑制，在腫瘤中被重新激活，端粒酶可能參與惡性轉化。科學家通過探究DNA載體途徑的RNA干擾技術抑制端粒酶的活性，從而抑制腫瘤細胞生長增殖以尋找一種抑制腫瘤細胞的新途徑。

　 方法思路：

　 ①構建干擾質粒　　　　　　　　　 （插入針對人體端粒酶逆轉錄酶亞基（hTERT）的mRNA的干擾序列）和對照質粒PSG—CTR（插入不針對人體任何mRNA序列的對照組序列）。

　 ②將空質粒PSG（不含目的基因）、干擾質粒和對照質粒分別感染肝癌細胞。

　












③一段時間后觀察檢測細胞的　　　　　　 　　　　　　　　。計算細胞凋亡率，繪制肝癌細胞生長曲線。結果如下圖：

　

請回答：

　 （1）完成實驗步驟中的空格：

　　　 ①　　　　　　　　　　　 ；②　　　　　　　　　　　 。

　 （2）在構建質粒時，要將質粒導入大腸桿菌細胞并用　　　　　　　 培養基進行篩選鑒定，然后再提取。因此，在構建的表達載體質粒上必須含有　　　　　　　 。

　 （3）端粒酶可以通過以自身的　　　　　 為模板，　　　　　　　　　 為原料來合成端粒DNA。

（4）根據題意請分析實驗結果并得出結論。

　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

Answer 1

 答案:（1）①PSG－AS  ③端粒酶活性、細胞凋亡情況、細胞生長情況

（2）選擇  標記基因

（3）RNA   4種脫氧核苷酸

（4）從結果可知PSG-AS導入肝癌細胞發揮作用后，端粒酶活性降低，細胞凋亡率升高，細胞生長受抑制，說明通過DNA載體途徑的RNA干擾技術抑制端粒酶活性的方法，能較好抑制腫瘤細胞。

解析: （1）由曲線圖或柱形圖可知，①為PSG－AS，③為端粒酶活性、細胞凋亡情況、細胞生長情況。（2）基因工程用選擇培養基進行篩選鑒定。（3）端粒酶是一種逆轉錄酶，進行逆轉錄。（4）從柱形圖可知PSG-AS導入肝癌細胞發揮作用后，端粒酶活性降低，細胞凋亡率升高；從曲線圖可知PSG-AS導入肝癌細胞發揮作用后，細胞生長受抑制。說明通過DNA載體途徑的RNA干擾技術抑制端粒酶活性的方法，能較好抑制腫瘤細胞。