Question

如下圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”示意圖。所用載體為質粒A。已知細菌B細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因，質粒A導入細菌B后，其上的基因能得到表達。請回答下列問題：

（1）人工獲得目的基因的途徑一般有哪兩條？

（2）如何將目的基因和質粒相結合形成重組質粒（重組DNA分子）？

（3）目前把重組質粒導入細菌細胞時，效率還不高；導入完成后得到的細菌，實際上有的根本沒有導入質粒，有的導入的是普通質粒A，只有少數導入的是重組質粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細菌是否導入了質粒A或重組質粒：將得到的細菌涂布在一個有氨芐青霉素的培養基上，能夠生長的就是導入了質粒A或重組質粒，反之則沒有。使用這種方法鑒別的原因是________。

（4）若把通過鑒定證明導入了普通質粒A或重組質粒的細菌放在含有四環素的培養基上培養，會發生的現象是________。原因是________。

（5）導入細菌B細胞中的目的基因成功表達的標志是什么？

Answer 1

答案：
解析：

答案：（1）（2）（5）見方法指導。 　　（3）普通質粒A和重組質粒都含有抗氨芐青霉素基因 　�。�4）有的能生長，有的不能生長　原因導入普通質粒A的細菌能生長，因為普通質粒A上有抗四環素基因；導入重組質粒的細菌不能生長，因為目的基因插在抗四環素基因中，抗四環素基因的結構被破壞 　　 　�。�2）將目的基因和質粒相結合形成重組質粒的過程是：①用一定的限制酶切割質粒，使其出現一個有黏性末端的切口；②用同種限制酶切斷目的基因，產生相同的黏性末端；③將切下的目的基因片段插入到質粒的切口處，再加入適量的DNA連接酶，使質粒與目的基因結合成重組質粒。 　�。�3）檢測質�；蛑亟M質粒是否導入受體細胞，均需利用質粒上某些標記基因的特性，即對已經導入質�；蛑亟M質粒處理的、本身無相應特性的受體細胞進行檢測，根據受體細胞是否具有相應的特性來確定。本題利用質粒上抗四環素和抗氨芐青霉素這兩個特性以及它們在質粒上的位置進行目的基因是否導入受體細胞的檢測�？拱逼S青霉素這種選擇培養基培養經過導入質粒處理的受體細胞，凡能生長的則表明質粒導入成功；不能生長的則無質粒導入。 　�。�4）抗四環素基因不僅在質粒上，而且它的位置正是目的基因插入質粒之處，因此有目的基因插入質粒形成重組質粒時，此處的抗四環素基因的結構和功能就會被破壞，當然含重組質粒的受體細胞就不能在含四環素的培養基上生長，而質粒上無目的基因插入的，四環素基因結構是完整的，這種受體細胞就能在含四環互素的培養基上生長。 　�。�5）基因成功表達的標志是受體細胞通過轉錄、翻譯過程合成出相應的蛋白質，即人的生長激素。