Question

10．下列基因工程操作步驟中，未發生堿基互補配對的是（　　）

• A． 基因表達載體的構建
• B． PCR技術獲得目的基因
• C． DNA分子雜交技術
• D． 抗原抗體雜交技術

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、構建基因表達載體時，目的基因與運載體的結合，黏性末端重組需要遵循堿基互補配對原則，A錯誤；
B、PCR技術的原理是DNA復制，因此用PCR擴增抗病毒基因時遵循堿基互補配對原則，B錯誤；
C、DNA分子雜交技術遵循堿基互補配對原則，C錯誤；
D、抗原抗體雜交技術利用蛋白質與抗原特異性結合，不涉及堿基互補配對，D正確．
故選：D．

點評 本題比較基礎，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的基本操作步驟，掌握各步驟中的相關細節，能根據題干要求作出準確的判斷，屬于考綱識記和理解層次的考查．