Question

【題目】基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒，便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—。根據下圖示判斷下列操作正確的是(　　)

A. 目的基因和質粒均用限制酶Ⅱ切割 B. 質粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

C. 目的基因和質粒均用限制酶Ⅰ切割 D. 質粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

Answer 1

【答案】D

【解析】限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-，限制酶II的識別序列和切點是-↓GATC-，可知限制酶Ⅱ能夠識別和切割限制酶Ⅰ切割后的黏性末端。據題圖可知，目的基因兩端分別是限制酶Ⅰ的識別序列和切點（是-G↓GATCC-）和限制酶Ⅱ的識別序列和切點（是-↓GATC-），只有用限制酶Ⅱ才能同時將目的基因切割下來；質粒有GeneⅠ和GeneⅡ表示兩種標記基因，分別有限制酶Ⅱ的識別序列和限制酶Ⅰ的識別序列，如果用限制酶Ⅱ切割，則GeneⅠ 和GeneⅡ都被破壞，造成重組質粒無標記基因；用限制酶Ⅰ切割，則破壞GeneⅡ，保留GeneⅠ，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以連接形成重組DNA，故選D。