Question

【題目】多氯聯苯是一種對人體有很大危害的有機物質，污染土壤后，很難清除。研究發現，部分酵母菌具有分解多氯聯苯的作用。為消除這種污染，科研人員計劃從被污染的土壤中篩選出高效分解多氯聯苯的菌株。請回答問題：

（1）篩選分解多氯聯苯的菌株時，應將土壤樣品溶解稀釋，接種到以_____為唯一碳源的培養基上。

菌落數 平板編號稀釋倍數	1	2	3
10	420	495	393
100	45	57	51
1000	2	7	3

（2）對初步提取到的菌株要進行_____培養，一般接種操作方法有兩種，其中之一是下圖所示的_____法。

（3）將酵母菌溶液分別稀釋 10 倍、100 倍、1000 倍。每個濃度都接種三個平板，每個平板均用_________接入 0．1mL 稀釋菌液，該接種方法是_____。培養時，需將培養皿_____培養，以防冷凝水造成污染。經適當培養后，平板上的菌落如上表所示：據此可得出，每升菌液中酵母菌活菌數為_____個。

（4）若要長期保存提純得到的菌種，可以采用_____的方法。

Answer 1

【答案】多氯聯苯 純化 平板劃線 移液槍 稀釋涂布平板法 倒置 5.1×107 甘油管藏

【解析】

微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經溶化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

（1）篩選分解多氯聯苯的菌株時，應將土壤樣品稀釋，接種到以多氯聯苯為唯一碳源的培養基上，只有能分解多氯聯苯的菌株才能在這樣的培養基中生存。

（2）對初步提取到的菌株要進行純化培養，一般操作方法有兩種，即平板劃線法和稀釋涂布平板法，圖示是利用平板劃線法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面。

（3）每個平板用移液槍接入0.1mL稀釋菌液，該接種方法是稀釋涂布平板法。培養時，為避免培養基中的水分蒸發形成水滴到培養基而造成污染，所以需將培養皿倒置。對菌落進行計數時，一般選擇菌落數在30~300的進行記數，求其平均值，因此選擇稀釋100倍的三個培養基進行計算，每升溶液中酵母菌活菌數=（45+57+51）÷3÷0.1×100×1000=5.1×107個/L。

（4）若要長期保存提純得到的菌種，可以采用甘油管藏的方法。