Question

【生物一生物技術實踐】

尿素是一種高濃度氮肥且長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細菌分解為氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的細菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。

某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統計每克土壤樣品中活菌數目，培養基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

   （1）根據培養基的成分判斷，該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌?_____（能／不能），原因是__________________________________。

   （2）要統計每克土壤樣品中活菌數目，宜采用     法接種，根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統計平板上的__________________就能大約推測出樣品中活菌數。

   （3）初步分離脲酶通常用       法，如下圖，試管中收集到的液體最先出現的是___________。鑒定分離出的脲酶純化程度，一般采用_______法。

   （4）該同學設想：由活性脲酶和尿素混合，制成“加酶尿素"，尿素肥效一定更高。為了提高“加酶尿素"中脲酶的利用率，應當采用          技術。

Answer 1

（1）不能  培養基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只分解尿素為氮源的微生物

   （2）稀釋涂布平板  菌落數目

   （3）凝膠色譜  相對分子質量較大的蛋白質 （凝膠）電泳

   （4）酶的固定化

解析:

考查分離土壤中分解尿素細菌。

選擇分解尿素的細菌必須用尿素為唯一氮源的選擇培養基；稀釋涂布法常用來統計樣品中活菌的數目；凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小分離蛋白質的有效方法；固定化酶技術在生產上的應用，這種酶的穩定性好，可以持續發揮作用。