Question

下圖中甲是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線，表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，乙中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入質粒，可以只用EcoR I同時酶切質粒和人乳鐵蛋白基因，也可以使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時酶切質粒和人乳鐵蛋白基因，后一個方法的優點在于可以防止 。

（2）為了獲取重組質粒，將切割后的質粒與目的基因片段混合，并加入______酶。重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了 。

（3）從分子水平簡述雌性轉基因牛分泌人乳鐵蛋白的過程是 。

（4）該雌性轉基因牛經與普通雄性個體交配所產的雌性后代是否也能分泌含人乳鐵蛋白的乳汁？為什么？ 。

Answer 1

（1）產生質粒和目的基因自身連接產物

（2）DNA連接酶 鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

（3）DNA（人乳鐵蛋白基因）轉錄成mRNA，mRNA翻譯成蛋白質（人乳鐵蛋白）

（4）不一定 因為該雌性轉基因牛產生的卵細胞可能含人乳鐵蛋白基因，也可能不含。

【解析】

試題分析：（1）只用EcoRI酶切割，質粒和目的基因兩端的粘性末端相同，用DNA連接酶連接時，會產生質粒和目的基因自身連接物，而利用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶剪切時，質粒和目的基因兩端的黏性末端不同，用DNA連接酶連接時，不會產生自身連接產物。

（2）為了獲取重組質粒，可以將切割后的質粒與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶；質粒中的抗生素抗性基因常用作標記基因，其作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

（3）人乳鐵蛋白是由乳鐵蛋白基因控制合成的，即DNA（人乳鐵蛋白基因）轉錄成mRNA，mRNA翻譯成蛋白質（人乳鐵蛋白）。

（4）該雌性轉基因牛相當于雜合子，所以其產生的卵細胞可能含人乳鐵蛋白基因，也可能不含，因此，該雌性轉基因牛與普通雄性個體交配，所產的雌性后代不一定也能分泌含人乳鐵蛋白的乳汁。

考點：本題考查基因工程的相關知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系，形成知識的網絡結構的能力。