Question

16．常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來進行酒精發酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖產生酒精，但是對酒精的耐受能力差．科學家利用基因工程培育了能利用這兩種糖進行發酵且對酒精耐受能力強的釀酒酵母．
（1）將自然界中采集到的葡萄帶回實驗室，用無菌水將葡萄皮上的微生物沖洗到無菌的三角瓶中，然后將瓶中的液體用稀釋涂布平板（平板劃線）法接種于固體培養基上，在適宜的條件下培養，獲得各種菌落．
（2）將培養基上的酵母菌菌株轉接到以木糖為唯一碳源的培養基中，無氧條件下培養一周后，有些酵母菌死亡，說明這些酵母菌不能利用木糖發酵．從存活的酵母菌中提取DNA，經大量擴增獲得目的基因．
（3）將目的基因連接到質粒上，該質粒具有的尿嘧啶合成酶基因可作為標記基因．將重組質粒導入酵母菌時，應選擇缺乏尿嘧啶合成能力的釀酒酵母作為受體菌．
（4）將上述獲得的轉基因釀酒酵母接種在以葡萄糖和木糖為碳源的培養基中進行發酵能力測試．隨著發酵的持續進行，若該釀酒酵母能夠存活，說明它能利用葡萄糖和木糖產生酒精，且對酒精的耐受能力強，即說明所需菌株培育成功．

Answer 1

分析 1、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法
2、根據題干信息“常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖”，則在以木糖為唯一碳源的培養基中死亡，“自然界中一些酵母菌能分解木糖產生酒精”說明這些酵母菌含有相關木糖發酵有關的酶的基因．釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來進行酒精發酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖產生酒精，但是對酒精的耐受能力差，涉及微生物實驗室培養的相關知識，科學家利用基因工程培育了能利用葡萄糖和木糖進行發酵且對酒精耐受能力強的釀酒酵母．
3、基因工程是為了培養能利用這兩種糖進行發酵且對酒精耐受能力強的釀酒酵母，所以檢測時應將培育獲得的轉基因釀酒酵母接種在含葡萄糖和木糖的培養基中進行酒精發酵能力測試，隨著發酵的持續進行，若該釀酒酵母能夠存活，說明它能利用葡萄糖和木糖產生酒精，且對酒精的難受能力強，即說明所需菌株培育成功．

解答 解：（1）接種微生物常用稀釋涂布平板法和平板劃線法．
（2）在以木糖為唯一碳源的培養基中，只有能分解木糖的酵母菌能生存，因此該培養基可以用來選擇能分解木糖的酵母菌．
（3）利用質粒上的標記基因表達的標記性狀可以判斷目的基因是否成功導入受體細胞，故應該選擇缺乏尿嘧啶合成能力的釀酒酵母作為受體菌．
（4）轉基因釀酒酵母能利用這葡萄糖和木糖進行發酵且對酒精耐受能力強，故應該接種在以葡萄糖和木糖為碳源的培養基中進行發酵能力測試．隨著發酵的持續進行，若該釀酒酵母能夠存活，說明它能利用葡萄糖和木糖產生酒精，且對酒精的耐受能力強．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板（平板劃線）
（2）以木糖為唯一碳源
（3）尿嘧啶合成
（4）葡萄糖    木糖     利用葡萄糖和木糖產生酒精，且對酒精的耐受能力強（合理即可）

點評 本題考查微生物培養和微生物的選擇的相關知識，要求考生明確微生物的培養和微生物選擇的方法，屬于考綱識記和理解層次的考查，這類試題需要考生在平時的學習過程中學會構建知識網絡結構．