Question

【題目】某種細菌可以分解石油殘存物(含有C、H、O元素)，現要分離、培養該細菌，操作步驟為：土壤取樣→選擇培養→梯度稀釋→涂布樣品到培養基→選擇菌落。請據此回答：

（1）細菌與真菌最主要的區別在于：細菌___________________________________。

（2）石油殘存物可以為該種細菌提供的營養物質是________________，分離該細菌的培養基從功能上叫做_____________培養基。

（3）取樣時用到的一切工具均需要__________________。梯度稀釋、涂布樣品到培養基則必須在_____________________(填場所)進行。

（4）若需要對細菌計數，常用的簡便方法是_______________，該方法測得的數目往往比實際值________________(填“大”或“小”)。

Answer 1

【答案】沒有以核膜為界限的細胞核 碳源 選擇 滅菌 酒精燈火焰旁 稀釋涂布平板法 小

【解析】

常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌；微生物的分離是研究和利用微生物的第一步，也是微生物工作的基本方法和重要環節。土壤中的微生物很多，要從土壤中獲得分解石油的細菌，接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線分離法：由接種環以菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續劃線，微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經培養后，可在平板表面得到單菌落，用途：一般多用于從菌種的純化；稀釋平板計數是根據微生物在固體培養基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養特征設計的計數方法，即一個菌落代表一個單細胞，計數時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養基內。

（1）原核生物和真核生物的本質區別是有無以核膜為界的細胞核，細菌屬于原核生物，真菌屬于真核生物，因此細菌與真菌相比的區別在于細菌沒有以核膜為界限的細胞核。

（2）微生物的生長需要碳源、氮源、水和無機鹽等，石油可為該細菌的生長繁殖提供碳源。分離細菌的培養基從功能上屬于選擇培養基。

（3）微生物培養需要無菌環境，因此取樣時用到的一切工具需要進行滅菌處理，使用稀釋涂布平板法對微生物進行分離培養時，梯度稀釋、涂布樣品到培養基等操作需要在酒精燈火焰旁進行。

（4）對細菌計數，常用的簡便方法是稀釋涂布平板法，由于兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只有一個菌落，因此該方法統計到的菌落數往往比實際值偏小。