Question

回答有關基因工程的問題：
（1）構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產生粘性末端，也可能產生

 

末端．若要在限制酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產生

 

（相同，不同）粘性末端的限制酶．
（2）利用大腸桿菌生產人胰島素時，構建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子的作用是

 

．在用表達載體轉化大腸桿菌時，常用

 

處理大腸桿菌，以利于表達載體進入：為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用標記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為

 

．為了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成

 

，常用抗原-抗體雜交技術．
如果要將某目的基因通過農桿菌傳話法導入植物細胞，先要將目睹基因插入農桿菌Ti質粒的

 

中，然后用該農桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的

 

上．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,基因工程的應用

專題：

分析：基因工程操作的工具是限制性內切酶、DNA連接酶和運載體；基因工程操作的步驟為提取目的基因、目的基因與運載體結合、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與表達．目的基因的檢測有多種手段，如①DNA分子雜交技術；②分子雜交技術；③抗原-抗體雜交技術．

解答： 解：（1）用限制酶切割DNA后，可能產生黏性末端，也可能產生平口末端．若要在限制酶基因工程中，往往采用同種限制酶切割目的基因和質粒以產生相同的黏性末端，再用DNA連接酶使其直接進行連接．
（2）RNA聚合酶識別和結合的部位是啟動子．將目的基因導入微生物細胞時，常用Ca²⁺處理微生物細胞，使其成為易于吸收周圍環境中DNA分子的感受態細胞，以利于表達載體進入．為了檢測目的基因是否轉錄出了mRNA，可采用分子雜交技術，即用放射性同位素標記的胰島素基因作探針與mRNA雜交；了檢測目的基因轉錄的mRNA是否翻譯成蛋白質，可采抗原--抗體雜交技術．
（3）采用農桿菌轉化法將目的基因導入植物細胞時，先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的T-DNA中，然后用該農桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的染色體DNA上．
故答案為：
（1）平   相同  
（2）提供RNA聚合酶特異性識別結合位點，驅動基因轉錄  Ca²⁺DNA-RNA分子雜交  胰島素原（蛋白質）  
（3）T-DNA   染色體

點評：本題考查基因工程的相關知識，只要考生識記基因工程的工具和操作步驟即可正確答題，屬于考綱識記層次的考查，此類試題，需要考生在平時的學習過程中學會構建知識網絡結構．