Question

下面是一項“利用轉基因番茄生產人胰島素的方法”的專利摘要，請回答：

本發明利用轉基因番茄作為生物反應器生產人胰島素。所用的人胰島素基因是依據植物“偏愛”的密碼子來設計所含的密碼子，通過人工合成若干DNA片段拼接而成，并且在胰島素COOH端加上KDEL內質網滯留序列，避免胰島素在植物細胞中的降解。將該基因置于CaMV 35S啟動子和果實專一性啟動子2A12的驅動之下通過農桿菌介導的方法轉入番茄中，在番茄的果實中表達人胰島素。

(1)本專利是采用__________方法獲得目的基因的。獲得的人胰島素基因與人體細胞中胰島素基因的堿基序列不同，但兩者所編碼的蛋白質中氨基酸序列相同，原因是__________________________________。

要想在體外獲得大量該目的基因的片段，可以采用____________技術。

(2)根據上述摘要，轉基因操作時所用的載體是__________。構建的基因表達載體中不會含有__________(從下列選項中選擇)。

①目的基因　　　　　　　　②CaMV 35S啟動子

③果實專一性啟動子2A12   ④引物

⑤標記基因                ⑥內含子滯留序列

⑦終止密碼子              ⑧終止子

(3)如果要檢測在受體細胞中是否存在目的基因可采用______________技術。該技術中使用的基因探針也可以用來檢測__________。

Answer 1

【解析】　本題考查基因工程的知識。由題意可知，所用的人胰島素基因是依據植物“偏愛”的密碼子來設計所含的密碼子，通過人工合成若干DNA片段拼接而成，所以本專利是采用人工合成方法獲得目的基因的。獲得的人胰島素基因與人體細胞中胰島素基因的堿基序列不同，但兩者所編碼的蛋白質中氨基酸序列相同，原因是密碼子具有簡并性，基因序列不同，蛋白質可以相同。基因表達載體組分比較多，主要是以下幾個：目的基因、CaMV 35S啟動子、果實專一性啟動子2A  12 標記基因。如果要檢測在受體細胞中是否存在目的基因可采用DNA分子雜交技術。該技術中使用的基因探針也可以用來檢測目的基因是否轉錄出mRNA。

【答案】　(1)人工合成　密碼子具有簡并性，基因序列不同，蛋白質可以相同　PCR

(2)農桿菌的Ti質粒　④⑥⑦

(3)DNA分子雜交　目的基因是否轉錄出mRNA