Question

【題目】在盛產柿子的某地，生物小組開展柿子酒、柿子醋生產的相關活動。

(1)土壤中的酵母菌計數：

在秋季的柿子園中，落地柿子流出的果汁的周圍土壤中有酵母菌大量生長繁殖。

①用滅過菌的小鐵鏟、信封取該處土樣、并在__________旁稱取l0g土樣，加入盛有90 mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。而后進行系列稀釋操作：吸取錐形瓶中土壤液的上清液__________ mL，轉移至盛有9mL無菌水的大試管中充分搖勻，依次等比稀釋，獲得稀釋至101、102、103、104倍的土壤液的稀釋液。

②為測定土壤中酵母菌的數量，選用第①步中所獲得的102、103、104倍的土壤液的稀釋液，并依次分別吸取0.1 mL進行平板涂布操作。在適宜條件下培養，當菌落數目穩定時，對各稀釋度涂布的三個平板進行菌落計數（如下表）。

則每克土壤樣品中的酵母菌數量約為____個。要使該實驗所得數據可靠，還應該實施的操作是____ 。

(2)柿子醋生產菌的制備：

為去掉酵母菌，挑取變酸的柿子酒內的菌膜于____C進行純化培養，獲得下圖所示菌落分布。應從____（填“甲”、“乙”或“丙”）區域中挑取部分菌落制玻片觀察，選擇所需菌種。

(3)柿子酒、柿子醋的制作（發酵裝置如上圖所示）：

①排氣口彎管設置的目的是________________________________。

②柿子醋可在柿子酒生產的基礎上改變__________進行生產。

Answer 1

【答案】 火焰 1 1.75×107 同時在各稀釋度組中，另加一個平板接種無菌水作為對照 3035 丙 在酒精發酵時用來排出CO2，防止空氣中微生物的污染 菌種和環境條件

【解析】（1）①為了避免微生物的污染，用滅過菌的小鐵鏟、信封取該處土樣、并在火焰旁稱取10g土樣，加入盛有90ml無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。而后進行系列稀釋操作：吸取錐形瓶中土壤液的上清液1ml，轉移至盛有9ml無菌水的大試管中充分搖勻，依次等比稀釋，獲得稀釋至101、102、103、104倍的土壤液的稀釋液。

②由于一般選擇菌落數在30-300的平板進行計數，因此選擇“稀釋度103倍”進行計算，每克土壤樣品中的酵母菌數量約=（178+191+156）÷3÷0.1×103×102÷10=1.75×107個。要使該實驗所得數據可靠，還應該實施的操作是同時在各稀釋度組中，另加一個平板接種無菌水作為對照。

（2）酵母菌適宜生存的溫度為18～25℃，為去掉酵母菌，挑取變酸的柿子酒內的菌膜（醋酸菌）于3035℃進行純化培養，獲得圖1所示菌落分布。丙中已形成單個菌落，因此需要從丙區域中挑取部分菌落制玻片觀察，選擇所需菌種。

（3）①排氣口彎管設置的目的是在酒精發酵時用來排出C02，防止空氣中微生物的污染。

②可通過裝置中的出料口對發酵情況進行及時監測．此時，若采用血細胞計數板對發酵液的酵母菌觀察計數，與（1）中計數方法相比，該計數方法測得的酵母菌數目較多。

③柿子醋可在柿子酒生產的基礎上改變菌種和環境條件進行生產，即菌種由酵母菌改為醋酸菌，環境條件由無氧、18～25℃改為通入氧氣、30～35℃。