Question

（知識遷移題）依據基因工程技術有關原理回答下列問題：

（1）限制性內切酶是在基因工程中用來切開DNA的酶，EcoRI是大腸桿菌的R型菌株分離而來的限制性核酸內切酶，它總是在一定的堿基序列中切斷DNA。以下的堿基序列表示的是EcoRI的識別序列，請用虛線在下圖中畫出EcoRI的作用部位：

（2）基因工程操作的基本步驟是：a________，b________，c________，d________。

（3）獲取目的基因途徑有________、________。

（4）下圖是將人類的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”的示意圖，所用的載體為質粒A。已知細菌B細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因，質粒導入細菌B后，其上的基因能得到表達。請回答下列問題：

①簡述重組質粒的主要過程：________。

②導入細菌B細胞的目的基因成功表達的標志是什么？________。

（5）假如預期到某種酶的功能，要設計相應的基因，下列圖示中①是________，②是________。

Answer 1

答案：
解析：

參考答案：（1） 　　（2）獲取目的基因　構建基因表達載體　將目的基因導入受體細胞　目的基因的檢測與鑒定 　　（3）物種分離　人工合成 　�。�4）①用一定的限制酶切割質粒，使其出現一個有黏性末端的切口；用同種限制酶切割目的基因，產生相同的黏性末端；將切下的目的基因片段插入到質粒的切口處，再加入適量的DNA連接酶，使質粒與目的基因結合成重組質粒②受體細胞通過轉錄、翻譯合成相應的蛋白質，即人的生長激素 　　（5）分子設計　氨基酸序列多肽鏈 　　解題探究：本題考查基因工程與蛋白質工程�；�因工程操作的基本步驟包括目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定四個步驟。限制性內切酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。提取目的基因主要有兩條途徑：一條是從供體細胞的DNA中直接分離基因；另一條是人工合成目的基因。目的基因與運載體結合：將目的基因與運載體結合的過程，實際上是不同來源的DNA重新組合的過程。蛋白質工程的原理是：預期功能→蛋白質三維結構→氨基酸序列（多肽鏈）→基因→具有預期功能的蛋白質。