Question

10．我國科學家建立了小鼠哺乳動物單倍體胚胎干細胞系，為基因操作找到了新的動物模型，從而解決了二倍體哺乳動物體細胞不易進行基因操作和篩選，而生殖細胞已高度分化，不能在體外擴增培養(yǎng)的困難．操作過程如圖所示，請據圖回答：

（1）圖中切割目的基因和載體所用的酶是EcoRI和BamHI，基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建，終止子的作用是使轉錄在所需要的地方停止下來．
（2）單倍體胚胎干細胞取自囊胚的內細胞團是，④過程采用的技術手段細胞融合，由此可見，單倍體胚胎干細胞能夠代替精子，使卵細胞成功“受精”，支撐小鼠胚胎的全程發(fā)育．
（3）早期胚胎能夠在受體內存活的主要生理學基礎是不發(fā)生免疫排斥．
（4）和生殖細胞相比，單倍體胚胎干細胞在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不分化．

Answer 1

分析 分析題圖：①是獲得小鼠的孤雄單倍體胚胎的過程；②是獲取胚胎干細胞；③是將重組質粒導入受體細胞中，不同的受體細胞采用的導入方法不同，如受體細胞是動物細胞，常用顯微注射法；④是誘導細胞融合過程，⑤是早期胚胎培養(yǎng)過程，⑥是胚胎移植過程．

解答 解：（1）含有目的基因的外源DNA分子中含有三種限制酶（EcoRI/SmaI/BamHI）的切割位點，但SmaI的切割位點在目的基因上，使用該酶切割會破壞目的基因，因此應選擇EcoRI和BamHI進行切割，再用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA．基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建；終止子的作用是使轉錄在所需要的地方停止下來．
（2）內細胞團能發(fā)育成胎兒的各種組織，滋養(yǎng)層將發(fā)育成胎膜和胎盤，因此單倍體胚胎干細胞取自囊胚的內細胞團．④過程中將胚胎干細胞和卵母細胞融合需要采用細胞融合技術．
（3）早期胚胎能夠在受體內存活的主要生理學基礎是受體子宮對移入的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥．
（4）和生殖細胞相比，單倍體胚胎干細胞在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不分化，而生殖細胞已高度分化，不能在體外擴增培養(yǎng)．
故答案為：
（1）EcoR I和BamH I     基因表達載體的構建    使轉錄在所需要的地方停止下來
（2）內細胞團   細胞融合   
（3）不發(fā)生免疫排斥 
（4）增殖而不分化

點評 本題結合圖解，考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記細胞工程和胚胎工程涉及的相關技術，能正確分析題圖，再結合所學的知識準確答題．