Question

【題目】Rag2基因缺失小鼠不能產生成熟的淋巴細胞。科研人員利用胚胎干細胞（ES細胞）對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療，其技術流程如圖（圖中數字序號表示的是相關過程）。請回答下列有關問題：

(1)過程①利用的技術是_______________,過程②利用的技術是_______________,過程③中涉及到了基因工程技術，其中作為受體細胞的是_______________。

(2)過程③中獲取的目的基因是_______________，可以根據該基因的____________設計引物，利用PCR技術擴增目的基因片段。按此方法和圖示技術流程，完成 Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的酶有___________________________和耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)等。

(3)圖中造血干細胞中的遺傳物質至少有 __________個來源。為檢測 Rag2基因的表達情況，可提取治療后小鼠骨髓細胞的蛋白質,用_________________進行雜交實驗。

Answer 1

【答案】 （體細胞）核移植 早期胚胎培養 ES細胞 正常的Rag2基因 脫氧核苷酸序列(或堿基對序列或遺傳信息） 限制性核酸內切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶 三 抗Rag2蛋白的抗體

【解析】試題分析：熟記并理解動物細胞培養、核移植技術、基因工程的基本操作程序及其應用等相關的基礎知識、形成清晰的知識網絡。在此基礎上結合題意并從圖示中提取信息作答。

(1) 過程①是將培養的上皮細胞的細胞核移入去核的卵母細胞形成重組細胞，進而得到重組胚胎，因此利用的技術是（體細胞）核移植技術。過程②利用的是早期胚胎培養技術。過程③是借助基因工程技術，將目的基因導入ES細胞，即作為受體細胞的是ES細胞。

(2) 過程③中獲取的目的基因是正常的Rag2基因。擴增Rag2基因，需根據一段已知Rag2基因的脫氧核苷酸序列(或堿基對序列或遺傳信息）設計引物。圖示中，獲得單個的上皮細胞需用胰蛋白酶；在將正常的Rag2基因導入ES細胞前需要用到限制性核酸內切酶、DNA連接酶構建基因表達載體；利用PCR技術擴增目的基因片段的過程中離不開耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)等酶。

(3) 圖中造血干細胞中的遺傳物質至少有三個來源，分別是Rag2基因缺失小鼠的上皮細胞的核基因、卵母細胞的細胞質基因和目的基因是（正常的Rag2基因）。為檢測 Rag2基因的表達情況，可提取治療后小鼠骨髓細胞的蛋白質，用抗Rag2蛋白的抗體進行雜交實驗。