Question

【題目】尿素是一種重要的農業肥料，但若不經細菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數量繁多，為探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌（目的菌）。培養基成分如下表所示，實驗步驟如圖所示。

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO47HO	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	10g	1g	15g
將上述物質溶解后，用蒸餾水定溶到1000mL，調pH為7.2

（1）培養基中加入尿素的目的是 ，這種培養基從物理性質劃分屬于_______培養基。“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養基中的 和 ，為了滿足圖示錐形瓶中目的菌對氧氣的需求，應采用的操作方法是 。

（2）圖中將細菌（非硝化細菌）轉到培養基上時，應采用 法接種，獲得單個菌落。初步篩選出來的菌種，還需要用生化的方法作進一步的鑒定：在此培養基中接種并培養初步篩選的菌種，若PH （降低/不變/升高），說明該菌種能夠分解尿素。

（3）A同學從培養基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落。A同學的實驗結果產生的原因可能有____________(填序號)。

①由于土樣不同 ②由于培養基被污染 ③由于操作失誤 ④沒有設置對照。

Answer 1

【答案】（1）篩選目的菌 固體（1分） 尿素 葡萄糖 振蕩培養（或攪拌）

（2）稀釋涂布平板 升高

（3）①②③

【解析】

（1）分析題圖培養基配方可知，此培養基是以尿素為唯一氮源的培養基，這樣只有能分解尿素的微生物才能生長，不能分解尿素的微生物因缺乏氮源而無法生長，起到了篩選能分解尿素的菌的作用．從物理形態看，培養基配方中含有凝固劑瓊脂，屬于固體培養基．“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養基中的氮源和葡萄糖．為了滿足圖示錐形瓶中液體培養基中目的菌對氧氣的需求，應采用的操作方法是振蕩培養（或攪拌）．

（2）將圖中的液體菌液轉移接種到固體培養基上需要使用稀釋涂布平板法接種．接種環需要進行灼燒滅菌．在此培養基中接種并培養初步篩選的菌種，尿素分解菌能夠將尿素轉化為氨而使pH升高，若PH升高說明該菌種能夠分解尿素．

（3）該同學與其他同學獲得的菌落數差異很大，可能的原因是采用的土樣不同，培養基滅菌不徹底，培養基被污染，或者是實驗過程中沒有進行無菌操作。