Question

(13分)Ⅰ．如圖表示運用基因工程技術生產胰島素的三條途徑。據圖結合所學知識回答下列問題：

(1)為了便于將含有目的基因的細胞篩選出來，所選擇的質粒上應該具有__________________。

(2)培育轉基因羊的過程中，科研人員通過感染或____________技術將重組質粒M轉移到受體細胞A中，受體細胞A應該是________細胞。③過程中還用到了__________________技術。

(3)受體細胞B應該是萵苣的________(填“體細胞”“卵細胞”或“受精卵)，導入該細胞后，需對該細胞進行培養，經________過程形成愈傷組織。

(4)萵苣為雙子葉植物，過程②常用的方法是________________；過程⑥常用的方法是用________來處理大腸桿菌，使其易于吸納重組質粒M。

Ⅱ、下圖四種質粒含有E₁和E₂兩種限制酶的識別位點，Ap^r表示抗青霉素的抗性基因，Tc^r表示抗四環素的抗性基因。

(1)將兩端用E₁切開的AP^r基因與用E₁切開的質粒X-1混合連接，連接后獲得的質粒類型有________（2分）。(可多選)

A．X-1    B．X-2

C．X-3    D．X-4

(2)若將上圖所示X-1、X-2、X-3、X-4四種質粒導入大腸桿菌，然后分別涂布在含有青霉素或四環素的兩種培養基上。在四環素的培養基不能生長的大腸桿菌細胞類型有________、________、__________。

 

Answer 1

【答案】

Ⅰ（1）標記基因   （2）顯微注射   受精卵    動物細胞培養、胚胎移植

（3）體細胞   脫分化    （4）農桿菌轉化法    鈣離子

Ⅱ（1）A、C     （2）無質粒細胞     含X-1的細胞     含X-3的細胞

【解析】

試題分析：Ⅰ、(1)質粒作為載體一般具有三個條件：有復制原點、有目的基因插入點、有標記基因。標記基因可以是抗生素抗性基因、熒光標記基因等，它有利于目的基因的檢測。

(2)在動物基因工程中，可利用顯微注射法將重組質粒導入到受精卵細胞中，因為受精卵比較大，易操作，并且受精卵的全能性高。受精卵可以用早期胚胎培養培養到桑椹胚或者囊胚，在通過胚胎移植技術導入到受孕母羊體內。

(3)植物基因工程中，一般利用體細胞作為受體細胞，然后利用植物組織培養技術首先進行脫分化形成愈傷組織，然后再進過再分化形成胚狀體進而發育成完整植株。

(4)雙子葉植物一般利用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞。當受體細胞是細菌時，常用Ca²⁺處理，得到感受態細胞，此時細胞壁和細胞膜的通透性增大，容易吸收重組質粒。

Ⅱ、（1）用E1切開的質粒X－1后，該質粒不含AP^r基因，因此AP^r基因與用E1切開的質粒X－1混合后，可能有三種結果，AP^r基因自身環化、質粒X－1自身環化（X-3）、AP^r基因和質粒X－1重新組合（X-1），有自身環化連接形成的X-1、X-3，故選A、C。

（2）Tc^r表示抗四環素的抗性基因，因此質粒中含有Tc^r基因的導入大腸桿菌中，大腸桿菌不死亡，即圖中X-2和X-4兩種質粒，因此無質粒細胞、含X-1的細胞、含X-3的細胞均不能生長。

考點：本題考查了基因工程的相關知識，意在考查考生能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論的能力；從題目所給的圖形中獲取有效信息的能力。