微生物的分離、培養和計數是現代生物工程應用中的重要環節。圖為大腸桿菌分離和
培養過程中部分操作示意圖。請分析回答下列問題:
(1)實驗過程中對培養基、培養皿、實驗操作者的雙手所采用的滅菌、消毒方法依次是 、 、 。
(2)培養大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養基是否被污染。對于固體培養基應采用的檢測方法是 。
(3)圖示是利用 法進行微生物接種,把聚集的菌種逐步 分散到培養基的表面。在灼燒接種環之后,要等其冷卻后再進行劃線的原因是 。
(4)關于圖示的操作方法和結果,敘述正確的是 。
A.操作前要將接種環放在火焰邊灼燒滅菌。
B.劃線操作須在火焰上進行。
C.在5區域中才可以提到所需菌落。
D.在1、2、3、4、5區域中劃線前后都要對接種環滅菌。
(5)若要培養具有耐高和耐酸特性的酵母菌,制備選擇培養基時在基本培養的基礎上,注意 和 ,其目的是 。
(1)高壓蒸汽滅菌 干熱滅菌 化學消毒
(2)將未接種的培養基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀察培養基上是否有菌落產生(2分)
(3)平板劃線 稀釋 以免接種環溫度太高,殺死菌種(2分)
(4)D(2分)
(5)添加高濃度蔗糖(葡萄糖) 調低pH 提供高糖和酸性的篩選環境(2分)
【解析】
試題分析:(1)無菌操作技術有消毒和滅菌,消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化學藥劑消毒法,滅菌有灼燒滅菌法適用于接種工具、干熱滅菌法適用于玻璃器皿和金屬工具、高壓蒸汽滅菌法適用于培養基及容器的滅菌。(2)略;(3)接種有平板劃線法和稀釋平板法,本題是后者,反復把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面,可以實現對菌種的分離,在操作過程中灼燒接種環之后,要等其冷卻后再進行劃線的原因是以免接種環溫度太高殺死菌種;(4)在1、2、3、4、5區域中劃線前后都要對接種環滅菌主要是稀釋作用;(5)選擇培養基的考查,根據菌種的特殊性制定培養基,使其他菌群不能在此生長,達到選擇的目的。
考點:本題考查微生物的分離和培養,意在考查考生能理解所學知識的要點。
科目:高中生物 來源: 題型:
根據各類微生物的形態結構特點和新陳代謝類型,利用選擇培養基和鑒別培養基,結合顯微鏡鏡檢以及菌落特征,可以把混雜在一起的大腸桿菌、硝化細菌、乳酸菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌、圓褐固氮菌分離開來。下面是分離篩選的方法步驟,請根據各個步驟的條件,填寫空格中的內容。?
首先配制一系列不同性質的固體培養基,然后進行高溫滅菌。再將上述微生物的混合液分別接種到各種培養基上進行培養。?
(1)用無氮培養基可以篩選出 。?
(2)用不含有機碳源的選擇培養基可以篩選出 。?
(3)酵母菌的篩選需要在常規培養基中另加入 。?
(4)用加了較高濃度NaCl的培養基可以篩選出 ,?
根據菌落的顏色呈現 色,將其挑取單獨培養。?
(5)利用伊紅——美藍培養基培養混合菌,菌落呈 色并帶有金屬光澤的為 ,挑取該菌落單獨培養。結合顯微鏡鏡檢和進一步用伊紅——美藍培養基鑒別來確定。?
(6)在無氧環境下培養混合菌, 可以生長。加入一定濃度的乳酸,使培養基pH充分降低,可抑制 菌的生長,利用菌落特征,結合顯微鏡鏡檢,選取具有生長優勢的菌落,即可分離出 。
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科目:高中生物 來源:2012-2013學年吉林省汪清六中高二下學期第一次月考生物試卷(帶解析) 題型:綜合題
根據各類微生物的形態結構特點和新陳代謝類型,利用選擇性培養基和鑒別培養基,結合顯微鏡檢以及菌落特征,可以把混雜在一起的大腸桿菌、硝化細菌、乳酸菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌、圓褐固氮菌分離開來。下面是分離篩選的方法步驟,請根據各個步驟的條件,填寫空格中的內容。
首先配制一系列不同性質的固體培養基,然后進行滅菌。再將上述微生物的混合液分別接種到各種培養基上進行培養。
⑴用無氮培養基可以篩選出 。
⑵用不含有機碳源的選擇培養基可以篩選出 。
⑶酵母菌的篩選需要在常規培養基另加入 。
⑷用加入了較高濃度的NaCl的選擇培養基可以篩選出 ,或者根據菌落的顏色呈現 色,將其挑取單獨培養。
⑸利用伊紅-美藍培養基培養混合菌,菌落呈 色,并帶有金屬光澤的是 ,挑取單個菌落培養。結合顯微鏡檢和進一步用伊紅-美藍培養基鑒別來確定。
⑹在無氧條件下培養混合菌, 可以生長,加入一定濃度的乳酸,使培養基pH充分降低,可抑制 菌的生長,利用菌落特征,結合顯微鏡檢,選取生長優勢的菌落,即可分離出 。
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科目:高中生物 來源:2012屆上海市上海理工大學附屬中學高三第三次月考生物試卷 題型:綜合題
生物乙醇是以生物為原料生產的可再生能源。我國利用農作物廢棄物(秸稈)生產乙醇,其技術流程為:纖維素酶分解→酵母菌發酵→蒸餾→成品。如果向含有纖維素培養基中加入剛果紅染液時,剛果紅會與纖維素形成紅色復合物,而呈現紅色,如果纖維素被降解,則培養基表面會形成以纖維素分解菌為中心的透明圈。 請分析回答下列問題:
71、纖維素酶可以從能分解纖維素的細菌培養液中提取。某同學設計了從土壤中分離纖維素分解菌的實驗流程:土壤取樣→選擇培養→梯度稀釋→鑒別培養。
①最好選擇 環境采集土樣。
②配置培養基時,各種成分在熔化后分裝前必須進行 ,接種前要進行 。在整個微生物的分離和培養中,一定要注意在無菌條件下進行。在制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的倒平板操作時,平板冷凝后,應將平板倒過來放置,這樣做的目的是 。
③以下是兩種培養基配方:
A培養基配方:
KH2P04 | Na2HP04 | MgS04.7H20 | 纖維素酶 | 葡萄糖 | 尿素 | 瓊脂 |
1.4g | 2.1g | 0.2g | 1g | 10.0g | 1.0g | 15.og |
KH2P04 | NaN03 | Na2HP04.7H20 | MgS04.7H20 | KCl | 纖維素粉 | 酵母膏 | 水解酪素 |
0.9g | lg | 1.2g | 0.5g | 0.5g | 5g | 0.5g | 0.5g |
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科目:高中生物 來源:2013屆安徽宿松復興中學高二下學期第三次月考生物試卷(解析版) 題型:綜合題
(8分) 根據各類微生物的形態結構特點和新陳代謝類型,利用選擇性培養基和鑒別培養基,結合顯微鏡檢以及菌落特征,可以把混雜在一起的硝化細菌、乳酸菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌、圓褐固氮菌分離開來。 下面是分離篩選的方法步驟,請根據各個步驟的條件,填寫空格中的內容。 首先配制一系列不同性質的固體培養基,然后進行滅菌。再將上述微生物的混合液分別接種到各種培養基上進行培養。
(1) 用無氮培養基可篩選出 ;
(2) 用不含有機碳源的選擇培養基可篩選出 ;
(3) 用加了較高濃度NaCl的選擇培養基可篩選出 , 或者根據菌落的顏色呈現 色,將其挑取單獨培養;
(4)在無氧環境下培養混合菌, 和 可以生長,加入一定濃度的乳酸,使培養基pH充分降低,可抑制 微生物的生長,利用菌落特征,結合顯微鏡檢,選取生長優勢菌落,即可分離出 。
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