Question

14．用基因工程技術可使大腸桿菌合成人的胰島素．下列敘述不正確的是（　　）

• A． 導入大腸桿菌的目的基因不一定成功表達
• B． 常用相同的限制酶處理目的基因和質粒
• C． DNA連接酶和RNA聚合酶是構建重組質粒必需的工具酶
• D． 可用含抗生素的培養基檢測大腸桿菌中是否導入了重組質粒

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、目的基因導入受體細胞后不一定能成功表達，A正確；
B、構建基因表達載體時，常用同種限制酶處理目的基因和質粒，以產生相同的黏性末端，B正確；
C、DNA連接酶和限制酶是構建重組質粒必需的工具酶，C錯誤；
D、抗生素抗性基因常作為基因工程的標記基因，因此可用含抗生素的培養基檢測大腸桿菌中是否導入了重組質粒，D正確．
故選：C．

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟的相關細節，能結合所學的知識準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．