Question

T-DNA可能隨機插入植物基因組內，導致被插入基因發生突變。用此方法誘導擬南芥產生突變體的過程如下：種植野生型擬南芥，待植物形成花蕾時，將地上部分浸入農桿菌（其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因）懸浮液中以實現轉化。在適宜條件下培養，收獲種子（稱為 代）。

（1）為促進植株側枝發育以形成更多的花蕾，需要去除       ，因為后者產生的        會抑制側芽的生長。

（2） 為篩選出已轉化的個體，需將T代播種在含        的培養基上生長，成熟后自交，收獲種子（稱為T代）。

（3） 為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將T代播種在含        的培養基上，獲得所需個體。

（4）經過多代種植獲得能穩定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起，需將該突變體與      植株進行雜交，再自交       代后統計性狀分離比。

（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失，

從該突變體的表現型可以推測野生型基因的存在導致植物的抗鹽性       。

（6）根據T-DNA的已知序列，利用PCR技術可以擴增出被插入的基因片段。其過程是：提取      植株的DNA，用限制酶處理后，再用       將獲得的DNA片段連接成環（如右圖）以此為模板，從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片斷中選取    作為引物進行擴增，得到的片斷將用于獲取該基因的全序列信息。

 

Answer 1

【答案】

 

【解析】略