Question

9．回答下列有關動物細胞培養的問題：
（1）在動物細胞培養過程中，當貼壁細胞分裂長年到細胞表面時，細胞會停止分裂增增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制．此時，瓶壁上形成的細胞層數是單層（或一層）．要使貼壁細胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是胰蛋白酶．
（2）隨首細胞傳代次數的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現衰老甚至死亡的現象；但極少數細胞可以連續增殖，其中有些細胞會因遺傳物質發生改變面變成細胞，該種細胞的黏著性降低，細胞膜表面蛋白質減少（糖蛋白）的量．
（3）現用某種大分子染料，對細胞進行染色時，觀察到死細胞被污色，而活細胞不染色，原因是由于活細胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進入活細胞內，故活細胞不能著色．
（4）檢查某種毒物是否能改變細胞染色體的數目，最好選用中細胞分裂到期的細胞用顯微鏡進行觀察．
（5）給患者移植經細胞培養形成的皮膚組織后，發生了排斥現象，這是因為機體把移植的皮膚組織當作抗原進行攻擊．

Answer 1

分析 1、動物細胞培養的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養．
2、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁．細胞數目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時，細胞就會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制．
3、動物細胞培養需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環境；②營養；③溫度和pH；④氣體環境：95%空氣+5%CO₂．

解答 解：（1）細胞的接觸抑制：細胞表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖．由于接觸抑制，動物細胞培養時，瓶壁上只能形成的單層細胞．可以用胰蛋白酶處理使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來．
（2）隨著細胞傳代次數的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現衰老甚至死亡現象，但極少數細胞可以連續增殖，其中有些細胞會因遺傳物質發生改（3）由于活細胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進入活細胞內，所以用某種大分子染料，對細胞進行染色時，觀察到死細胞被染色，而活細胞不能被染色．變而變成不死性細胞，該種細胞的細胞膜表面蛋白質（糖蛋白）減少，細胞的黏著性降低．
（4）有絲分裂中期，細胞中染色體形態固定、數目清晰，是觀察染色體的最佳時期．所以檢查某種毒物是否能改變細胞染色體的數目，最好選用細胞分裂到中期的細胞用顯微鏡進行觀察．
（5）器官移植后發生排斥反應由于機體把移植的皮膚組織當作抗原進行攻擊導致的．
故答案為：
（1）相互接觸接觸抑制單層（或一層）胰蛋白酶
（2）衰老甚至死亡    不死性    降低   減少
（3）由于活細胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進入活細胞內，故活細胞不能著色（或由于死細胞的膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進入死細胞內而著色）
（4）中
（5）抗原

點評 本題綜合考查動物細胞培養、細胞膜的特點、細胞有絲分裂不同時期的特征、細胞保持及免疫的相關知識，重點考查動物細胞培養的相關內容，要求考生識記動物細胞培養的過程、條件和應用等知識，能靈活的運用所學的知識解答問題．