Question

【題目】鯨死亡后會沉入海底，俗稱“鯨落”。“鯨落”后期會形成一個以厭氧菌和硫細菌等為主體的生態系統。厭氧菌以“鯨落”肌肉中的脂肪為食，同時產生一些硫化氫等硫化物。硫細菌將硫化物氧化成硫酸鹽，并以該過程中釋放的能量合成有機物。請回答相關問題：

（1）培養微生物的培養基中一般都會含有水、無機鹽、氮源和碳源，培養“鯨落”群落中厭氧菌的碳源必須是______________。要培養硫細菌，培養基中的成分需要特殊配制，主要體現在_________________________，這種培養基可以用來專一性培養硫細菌，所以稱為__________________培養基。

（2）在分離“鯨落”中的微生物時要制備固體培養基，在倒平板操作后，將平板倒置，這樣做的目的是______

（3）科學家欲研究死鯨的遺傳屬性，在“鯨落”中提取到了死鯨的DNA,然后可以用________技術對其DNA進行擴增，在擴增死鯨DNA的過程中，除了要加入死鯨的DNA作模板外，還需要加入_________________________（至少答兩種）等物質。

（4）為了研究“鯨落”中含有微生物的情況，需將“鯨落”提取物加水稀釋，然后將稀釋水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養基的表面進行培養，這種方法稱為_______________________。下面所示的四種菌落分布情況中，不可能由該方法得到的是___________。

Answer 1

【答案】含碳有機物（或脂肪） 碳源必須是含碳無機物（或碳酸鹽），同時加入硫化物 選擇 防止培養皿蓋上凝結的水珠落入培養皿造成污染，還可使培養皿表面的水分更好地揮發（防止細菌透過皿低、皿蓋的縫隙，落在培養基上） PCR 引物、耐高溫的DNA聚合酶、四種脫氧核苷酸 稀釋涂布平板法 D

【解析】

微生物生長所需要營養成分包括碳源、氮源、水和無機鹽等，對于異養微生物，需要添加有機碳源。自養微生物的培養不需要添加含碳有機物。選擇培養基是人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養、溫度．pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長的培養基。微生物接種的方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法。

（1）厭氧菌以“鯨落”肌肉中的脂肪為食，屬于異養微生物，故培養“鯨落”群落中厭氧菌的碳源必須是含碳有機物（或脂肪）。硫細菌將硫化物氧化成硫酸鹽，并以該過程中釋放的能量合成有機物，即硫細菌為自養生物，所以要培養硫細菌，培養基中的成分需要特殊配制，主要體現在碳源必須是含碳無機物（或碳酸鹽），同時加入硫化物。這種人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養、溫度．pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長的培養基為選擇培養基。

（2）在倒平板操作后，將平板倒置，這樣做的目的是防止培養皿蓋上凝結的水珠落入培養皿造成污染，還可使培養皿表面的水分更好地揮發（防止細菌透過皿低、皿蓋的縫隙，落在培養基上）。

（3）用PCR技術可實現對DNA的體外擴增。PCR擴增的條件為DNA模板、引物、耐高溫的DNA聚合酶、四種脫氧核苷酸。

（4）使用涂布器涂布的接種微生物的方法為稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法接種的微生物會在培養基上形成均勻分布的菌落，而平板劃線法接種的微生物在劃線的起始部分菌落連在一起生長，由圖可知，A、B、C均形成了均勻分布的單個菌落，屬于稀釋涂布平板法接種的，而D中菌落是連在一起生長的，是通過平板劃線法接種的，所以D符合題意，ABC不符合題意。

故選D。