Question

花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質體作為部分遺傳物質的供體與完整的花椰菜原生質體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖：

據圖回答下列問題：

(1)過程①所需的酶是______________________________________________________。

(2)過程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的________存在，這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標志。

(3)原生質體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是________________。原生質體經過________再生，進而分裂和脫分化形成愈傷組織。

(4)若分析再生植株的染色體變異類型，應剪取再生植株和________植株的根尖，通過________、________、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數目。

 

Answer 1

【答案】

(1)纖維素酶和果膠酶

(2)葉綠體

(3)保持原生質體完整性? 細胞壁

(4)雙親(或花椰菜和黑芥)? 解離? 漂洗

【解析】(1)過程①是利用纖維素酶和果膠酶去除幼葉細胞和根細胞的細胞壁，制備相應原生質體；

(2)過程②在PEG的作用下兩個原生質體融合在一起，形成雜種細胞，來自幼葉的原生質體中有葉綠體存在，可以作為顯微鏡下初步篩選雜種細胞的標志；

(3)原生質體及剛形成的雜種細胞因為沒有了細胞壁的束縛作用，必須浸泡在適宜濃度且無毒害作用的等滲溶液中，以保持原生質體的完整性，原生質體經過細胞壁的再生后，才能進而分裂和脫分化形成愈傷組織。

(4)若分析再生植株的染色體變異類型，應剪取再生植株和雙親植株的分生組織(如根尖)，通過解離、漂洗、染色和制片等過程制成裝片，再在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數目。