Question

14．下列關于基因工程技術的敘述，正確的是（　　）

• A． 切割質粒的限制性核酸內切酶均特異性地識別6個核苷酸序列
• B． 質粒是細胞內一種結構簡單、能自我復制的細菌擬核DNA
• C． PCR反應中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應
• D． 抗蟲基因即使成功地插入到植物細胞染色體上也未必能正常表達

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運載體：常用的運載體有質粒（質粒是一種裸露的、結構簡單、獨立于細菌擬核DNA之外并具有自我復制能力的雙鏈環狀DNA分子．）、噬菌體的衍生物、動植物病毒．
2、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、切割質粒的限制性核酸內切酶均能特異性地識別核苷酸序列，但識別的核苷酸序列不一定是6個，A錯誤；
B、質粒是一種裸露的、結構簡單、獨立于細菌擬核DNA之外并具有自我復制能力的雙鏈環狀DNA分子，B錯誤；
C、PCR反應中溫度的周期性改變是為了變性、復性、延伸，C錯誤；
D、抗蟲基因即使成功地插入到植物細胞染色體上也未必能正常表達，需要進行檢測和鑒定，D正確．
故選：D．

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及特點、操作步驟等，能結合所學的知識準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．