Question

【題目】結合下圖，回答有關植物轉基因和克隆的問題：

（1）Ti質粒攜帶的目的基因是位于Ti質粒的__________中。愈傷組織細胞是具有__________能力的薄壁細胞。

（2）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟，第三步是將目的基因導入受體細胞，圖中屬于該步的編號是__________，導入方法是__________。

（3）如果目的基因序列已知，常用PCR擴增技術來獲取目的基因，該技術中，引物序列的設計是關鍵。設計引物時，需要避免引物之間發生__________而造成引物失效。為了便于擴增的DNA片段與表達載體連接，常在兩條引物上設計加入不同的限制酶識別位點，主要目的是__________。

（4）__________技術常用于植物克隆，圖中屬于該過程的編號是__________。

Answer 1

【答案】T-DNA 分生（較強的增殖分化） ①② 農桿菌轉化法、基因槍法 堿基互補配對 使目的基因定向插入表達載體 植物組織培養 ⑤⑥

【解析】

分析圖示，過程①是攜帶目的基因的農桿菌感染植物，獲得含有目的基因的植物細胞，過程②是將含有目的基因的金屬顆粒轟擊植物細胞，使目的基因整合到受體細胞的染色體上，過程⑤⑥為植物組織培養形成個體的過程。

（1）Ti質粒的T-DNA可轉移到受體細胞，并整合到受體細胞染色體的DNA上，所以Ti質粒攜帶的目的基因是位于Ti質粒的T-DNA中。愈傷組織細胞是具有分生（較強的增殖分化）能力的薄壁細胞。

（2）基因工程的第三步是將目的基因導入受體細胞，根據分析可知，圖中屬于該步的編號是①②，①的導入方法是農桿菌轉化法，②的導入方法為基因槍法。

（3）設計引物時需要避免引物之間堿基互補配對而造成引物自連的現象。為了便于擴增的DNA片段與表達載體連接，常在兩條引物上設計加入不同的限制酶識別位點，主要目的是使目的基因能定向插入表達載體，減少自連。

（4）植物組織培養技術常用于植物克隆，圖中屬于該過程的編號是⑤脫分化和⑥再分化。