Question

11．IP10是人體某些細胞中表達的細胞因子，為探究IP10對腫瘤細胞免疫應答的影響，科學家進行了有關研究．請分析回答：

（1）在機體抗腫瘤過程中，特異性免疫和非特異性免疫均發揮一定作用，細胞免疫過程中主要的效應細胞是效應T細胞．
（2）獲取IP10基因，構建重組質粒并導入乳腺腫瘤細胞，篩選成功表達IP10的細胞命名為IP10細胞，將IP10細胞、乳腺腫瘤細胞和導入空質粒的乳腺腫瘤細胞分別在體外培養，定期取樣、計數并繪制生長曲線，結果如圖1，再將三種細胞分別接種于健康小鼠乳腺部位皮下，觀察小鼠腫瘤生長狀況，結果如圖2．
①繪制生長曲線時，對腫瘤細胞進行計數需要使用ac．
a．血細胞計數板　　b．固體平板培養基　　c．顯微鏡　　d．涂布器
②測定導入空質粒的乳腺腫瘤細胞的生長曲線的目的是：排除導入的空質粒對乳腺腫瘤細胞增殖的影響．
③據圖分析，導入IP10基因對體外培養的乳腺腫瘤細胞的增殖無明顯影響，對體內腫瘤的生長有明顯的
抑制作用．
（3）為進一步探究IP10對腫瘤免疫的作用機理，從前面接種了三種不同細胞的小鼠體內分離得到脾臟淋巴細胞和腫瘤內淋巴細胞，分別加入滅活的乳腺腫瘤細胞作為抗原，適宜條件下培養到54h時，在細胞培養液中加入³H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸，繼續培養18h后，收獲細胞并檢測其放射性，結果如圖3所示．
①在細胞培養液中加入³H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸的目的是：標記的增殖細胞．
②對照組細胞的處理是：除不加入滅活的乳腺腫瘤細胞外，其他處理與實驗組相同．
③實驗結果說明：IP10能促進脾臟淋巴細胞和腫瘤內淋巴細胞的增殖，從而發揮抗腫瘤作用．

Answer 1

分析 獲取IP10基因，構建重組質粒并導入乳腺腫瘤細胞，篩選成功表達IP10的細胞命名為IP10細胞，將IP10細胞、乳腺腫瘤細胞和導入空質粒的乳腺腫瘤細胞分別在體外培養，定期取樣、計數并繪制生長曲線，結果如圖1，從圖1中可以看出三條曲線的變化趨勢基本一致，所以導入IP10基因對體外培養的乳腺腫瘤細胞的增殖沒有明顯影響．再將三種細胞分別接種于健康小鼠乳腺部位皮下，觀察小鼠腫瘤生長狀況，結果如圖2．從圖2中可以看出，導入了IP10基因的細胞使小鼠產生的腫瘤明顯小于其他兩組，所以它對體內腫瘤的生長有明顯的抑制作用．從圖3中可以看出“接種IP10細胞的小鼠”實驗組的放射性強度明顯高于其他組，可見IP10基因能夠促進脾臟淋巴細胞和腫瘤內淋巴細胞的增殖，進而發揮抗腫瘤的作用．

解答 解：（1）在機體抗腫瘤的過程中，特異性免疫和非特異性免疫均發揮作用．細胞免疫過程中，效應T細胞與被抗原入侵的宿主細胞（即靶細胞）密切接觸，導致靶細胞裂解死亡．
（2）①在對動物細胞進行計數時，常采用抽樣檢測法，需要使用血球計數板和顯微鏡．
②在將IP10基因導入到乳腺腫瘤細胞中時，是連在質粒上導入的，那么在出現相應的性狀變化時，也有可能是質粒本身所導致的；在導入細胞的過程中，也可能會有未連接目的基因的空質粒進入細胞．所以，測定導入空質粒的乳腺腫瘤細胞的生長曲線就是為了排除導入的空質粒對乳腺腫瘤細胞增殖的影響．
③圖1是對體外培養的細胞進行的測定，圖2是對接種于小鼠體內的細胞進行的測定．
從圖1中可以看出三條曲線的變化趨勢基本一致，所以導入IP10基因對體外培養的乳腺腫瘤細胞的增殖沒有明顯影響．從圖2中可以看出，導入了IP10基因的細胞使小鼠產生的腫瘤明顯小于其他兩組，所以它對體內腫瘤的生長有明顯的抑制作用．
（3）①由于3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸是構成DNA的基本單位．細胞增殖時會進行DNA的復制，由于此時會利用3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸，所以增殖產生的細胞就會被放射性標記．
②該實驗以放射性強度（反映淋巴細胞的增殖情況）作為檢測指標，加入滅活的乳腺腫瘤細胞作為抗原刺激淋巴細胞增殖，為排除其他因素導致的淋巴細胞增殖對結果的干擾，所以應該設置不加抗原的一組作為對照組．
③由第①可知，放射性強度越高，則淋巴細胞的增殖能力越強．從圖3中可以看出“接種IP10細胞的小鼠”實驗組的放射性強度明顯高于其他組，可見IP10基因能夠促進脾臟淋巴細胞和腫瘤內淋巴細胞的增殖，進而發揮抗腫瘤的作用．
故答案為：
（1）非特異性免疫  T細胞
（2）①a、c
②排除導入的空質粒對乳腺腫瘤細胞增殖的影響
③無明顯影響   抑制
（3）①增殖
②滅活的乳腺腫瘤細胞
③促進脾臟淋巴細胞和腫瘤內淋巴細胞的增殖

點評 結合IP10對腫瘤細胞免疫應答考查細胞免疫和體液免疫以及對照試驗的設置和分析，主要考查學生對實驗的讀圖和綜合分析能力．