Question

【題目】轉基因克隆豬已經在我國培育成功。研究組首先從豬胎兒皮膚細胞中分離出纖維細胞，進行體外培養，通過電穿孔的方法將構建好的基因表達載體轉入纖維細胞，經篩選后將轉基因纖維細胞進行體細胞克隆。接著，將重組胚胎移入代孕母豬體內，最終獲得轉基因克隆豬。請回答：

（1）在進行體細胞克隆前，先要從屠宰場收集豬卵巢，采集__________，并在體外培養成熟。然后將轉基因纖維細胞注入到__________中，再經過一系列過程獲得含有目的基因重組胚胎。

（2）為了提高重組胚胎的利用率，可以對處于__________階段的胚胎進行均等分割。將重組胚胎移入到受體子宮后，由于受體子宮不會對外來胚胎發生免疫排斥反應，并能與之建立正常的__________上的聯系，因此重組胚胎能在受體子宮中繼續發育成轉基因克隆豬。

（3）生態系統內即使某個物種由于某種原因而死亡，也會很快有其他物種占據它原來的生態位置，從而避免系統結構或功能失衡。這最主要體現了生態工程的__________原理（只填一項）。

Answer 1

【答案】卵母細胞 去核卵母細胞 桑椹胚或囊胚 生理和組織 物種多樣性

【解析】

1、動物細胞培養的無菌、無毒的環境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養液，以清除代謝廢物。
2、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣，將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術，個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
3、胚胎移植的生理基礎（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環境；
（2）胚胎在早期母體中處于游離狀態，這就為胚胎的收集提供了可能；
（3）子宮不對外來胚胎發生免疫排斥反應，這為胚胎在受體內的存活提供了可能。
4、選用去核卵（母）細胞的原因：卵（母）細胞大，容易操作；卵（母）細胞質多，營養豐富；含有促使細胞全能性表達的物質。
5、物種多樣性原理：物種繁多復雜的生態系統具有較高的抵抗力穩定性。

（1）體細胞克隆是將體細胞核移植入去核的卵母細胞中，卵母細胞可從屠宰場收集豬的卵巢，并在體外培養成熟。將轉基因纖維細胞注入到去核卵母細胞中，再經過一系列過程獲得含有目的基因重組胚胎。

（2）為了提高重組胚胎的利用率，可以對處于桑椹胚或囊胚階段的胚胎進行均等分割；將重組胚胎移入到受體子宮中之所以成功，原因之一是由于受體子宮不會對外來胚胎發生免疫排斥反應，并能與之建立正常的生理和組織上的聯系，因此，重組胚胎能在受體子宮中繼續發育成轉基因克隆豬。

（3）題干材料反映的是生物多樣性程度高，可以為各類生物的生存提供多種機會和條件，因此應體現生態工程的物種多樣性原理。