Question

8．為了獲得抗體基因功能缺失的轉基因山羊，擬采用體細胞基因打靶技術，通過體細胞的同源重組，敲除山羊的抗體重鏈基因，并以其為受體轉入人的抗體基因，用于制備完全人源化抗體．獲得抗體基因功能缺失的轉基因山羊的過程如圖所示．

（1）過程①的處理方法是胰蛋白酶．
（2）過程②中每3～4天更換一次培養液，目的是清除代謝廢物．為了防止培養過程雜菌污染，培養液中需添加一定量的抗生素．
（3）過程③電穿孔的目的是誘導質粒導入受體細胞．使GTIgH質粒線性化的處理方法是用限制酶處理．
（4）過程⑤PCR鑒定的過程是將細胞中的DNA提取出來，用PCR技術進行擴增，然后用DNA分子雜交原理進行鑒定．
（5）經過程⑤獲得的抗體基因功能缺失的細胞不能直接誘導分化得到抗體基因功能缺失的轉基因山羊，原因是動物細胞的全能性隨分化程度提高而受到限制，分化潛能變弱．
（6）過程⑥涉及到的技術有細胞核移植．

Answer 1

分析 據圖示可知，①②為動物細胞培養的過程，③為誘導質粒導入受體細胞的過程，④為細胞培養過程，⑤為特定細胞的篩選過程，⑥為動物克隆過程．

解答 解：（1）動物細胞培養時，需用胰蛋白酶處理組織，形成分散的細胞懸液，然后進行原代培養；待細胞貼滿瓶壁后，再用胰蛋白酶分散為單個細胞，制成細胞懸液，進行傳代培養．
（2）過程②中每3～4天更換一次培養液，目的是清除代謝廢物，防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害．由于抗生素能抑制細菌生長，為了防止培養過程雜菌污染，培養液中需添加一定量的抗生素．
（3）過程③電穿孔的目的是誘導質粒導入受體細胞．使GTIgH質粒線性化的處理方法是用限制酶處理．
（4）鑒定DNA分子是否含有特定的基因可用DNA分子雜交技術進行鑒定．
（5）動物細胞不能直接培養獲得動物體，原因是動物細胞的全能性隨分化程度提高而受到限制，分化潛能變弱．
（6）過程⑥為克隆過程，涉及到的技術有細胞核移植．
故答案為：
（1）胰蛋白酶 
（2）清除代謝廢物  抗生素 
（3）誘導質粒導入受體細胞  限制酶
（4）DNA分子雜交 
（5）動物細胞的全能性隨分化程度提高而受到限制，分化潛能變弱  
（6）細胞核移植

點評 本題考查了基因工程的應用和細胞過程等相關知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯系，形成知識網絡結構的能力；能運用所學知識，對生物學問題作出準確判斷的能力．