Question

5．科學家從某無限增殖的細胞中分離出無限增殖調控基因（prG），該基因能激發細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景．請回答下列問題：：
（1）利用動物細胞融合技術制備單克隆抗體，常用聚乙二醇、滅活的病毒、電激等誘導因素誘導細胞融合．再經多次篩選和細胞培養獲得足夠數量的能分泌所需抗體的雜交瘤細胞．
（2）有人提出用核移植技術構建重組細胞來生產單克隆抗體，請完成設計方案：
①取特定抗原刺激的B淋巴細胞的細胞核，移植到去核的能夠無限增殖的細胞中，構成重組細胞．（假定移植后細胞核中基因的表達狀態不受影響）
②將重組細胞在體外條件下做大規模培養或注射到小鼠腹腔內增殖，以獲得大量單克隆抗體．
（3）也有人提出，可以直接通過基因工程導入該調控基因（prG）來制備單克隆抗體，其思路如圖所示．
①酶A是指限制性核酸內切酶，酶B是指DNA連接酶．
②圖中Ⅰ表示目的基因（無限增殖調控基因或prG），對Ⅱ進行檢測與鑒定的目的檢測目的基因是否導入和是否表達，Ⅲ具有的特點是既能無限增殖，又能產生特定抗體．

Answer 1

分析 據圖分析，用酶A（限制酶）處理供體DNA分離出無限增殖調控基因，用同種限制酶切割質粒形成相同的黏性末端，用酶B（DNA連接酶）處理形成重組質粒，導入Ⅱ（效應B細胞），形成重組細胞Ⅲ，特點能無限增殖，又能產生特定抗體．

解答 解：（1）動物細胞融合技術最重要的用途就是制備單克隆抗體，常用聚乙二醇、滅活的病毒、電激等誘導因素誘導細胞融合．再經多次篩選和細胞培養獲得足夠數量的能分泌所需抗體的雜交瘤細胞．
（2）①取特定抗原刺激的B淋巴細胞的細胞核，移植到去核的骨髓瘤細胞中，因為骨髓瘤細胞的細胞質中有無限增殖調控基因（prG），構成重組細胞．
②將重組細胞在體外條件下大規模培養或注射到小鼠腹腔內增殖，以獲得大量單克隆抗體．
（3）①圖中酶A是限制性核酸內切酶，酶B是DNA連接酶．
②圖中Ⅰ表示目的基因（無限增殖調控基因或prG），對Ⅱ進行檢測與鑒定的目的是檢測目的基因是否導入和是否表達，具有的特點是既能無限增殖，又能產生特定抗體．
故答案為：
（1）動物細胞融合　滅活的病毒　 雜交瘤
（2）①特定抗原刺激的B淋巴　無限增殖　
②體外　腹腔
（3）①限制性核酸內切酶　DNA連接酶　
②目的基因（無限增殖調控基因或prG）    檢測目的基因是否導入和是否表達　  既能無限增殖，又能產生特定抗體

點評 本題考查單克隆抗體的制備、核移植、基因工程等相關知識，意在考查學生的識記、理解能力，屬于中檔題，解題的關鍵是獲得重組細胞，特點是既能大量增殖，又能產生特異性抗體．