Question

【題目】科學家利用基因工程和細胞核移植技術培育了綠色熒光蛋白轉基因克隆豬。基本流程是：從熒光水母中獲取目的基因，與有關載體重組，將其導入豬胎兒的成纖維細胞，經培養后再將成纖維細胞核植入去核的卵母細胞中，最后培養出轉基因克隆豬。

（1）成纖維細胞貼壁生長分裂到表面相互接觸時，就會停止分裂，這種現象叫做細胞的___________________。若將成纖維細胞進行傳代培養，操作時首先用______________________________處理成細胞懸液。

（2）作為核移植受體細胞的去核卵母細胞一般處在____________期。供體細胞注入去核的卵母細胞中，常通過__________（物理方法）激活重組細胞，使其完成細胞分裂和發育進程。

（3）培養重組細胞時，將細胞所需的營養物質按其種類．數量嚴格配制而成的培養基稱為___________培養基，但通常在培養基中還需要加入適量的_________________________等天然成分。細胞培養應在含5%的CO2的恒溫培養箱中進行，CO2的主要作用是____________________。為了防止細胞培養過程中細菌的污染，可向培養液中加入適量的____________。

Answer 1

【答案】接觸抑制 蛋白酶 MⅡ中（減數第二次分裂中） 電脈沖（或電刺激） 合成 血清（或血漿） 調節培養基的pH 抗生素

【解析】

1.動物細胞培養的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養液中（原代培養）→放入二氧化碳培養箱培養→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉入培養液（傳代培養）→放入二氧化碳培養箱培養。

2.動物細胞培養條件：

（1）無菌、無毒的環境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養液，以清除代謝廢物；

（2）營養物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質；

（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4；

（4）氣體環境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養液的pH）。

（1）細胞貼壁生長分裂到表面相互接觸時，就會停止分裂，這種現象叫做細胞的接觸抑制。若將成纖維細胞進行傳代培養，操作時首先用胰蛋白酶處理成細胞懸液。

（2）選取處在MⅡ中（減數第二次分裂中）期的去核卵母細胞作為受體細胞；通過電脈沖（或電刺激）激活重組細胞，使其完成減數分裂和發育進程。

（3）將細胞所需的營養物質按其種類、數量嚴格配制而成的培養基稱為合成培養基。動物細胞所需的營養物質：糖、氨基酸、促生長因 子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質。細胞培養應在含5%的CO2的恒溫培養箱中進行，CO2的主要作用是調節培養基的pH。為了防止細胞培養過程中細菌的污染，可向培養液中加入適量的抗生素。