Question

【題目】蘇云金桿菌(Bt)能產生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖(為抗氨芐青霉素基因)，據圖回答下列問題。

(1)將圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應管中有___________種DNA片段。

(2)圖中②表示HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得______種重組質粒；如果換用Bst l與BamHⅠ酶切，目的基因與質粒連接后可獲得___________種重組質粒。

(3)目的基因插入質粒后，不能影響質粒的___________。

(4)圖中③的Ti質粒調控合成的vir蛋白，可以協助帶有目的基因的T—DNA導人植物細胞，并防止植物細胞中_____對T—DNA的降解。

(5)已知轉基因植物中毒素蛋白只結合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風險相對較小，原因是人類腸上皮細胞___________。

(6)生產上常將上述轉基因作物與非轉基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的___________基因頻率的增長速率。

Answer 1

【答案】4 2 1 復制 DNA水解酶 表面無相應的特異性受體 抗性

【解析】

分析題圖：圖示表示轉Bt毒蛋白基因植物的培育過程，其中①是含有目的基因的外源DNA分子，其中含有限制酶HindⅢ、BamHⅠ和BstⅠ的切割位點，且BamHⅠ和BstⅠ的識別序列相同；②表示基因表達載體的構建過程；③表示采用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞的過程；④表示目的基因的表達。

（1）由于上述兩種酶形成的末端不一樣，所以被兩種不同的限制酶切割之后所形成的片段有AA、AB、BA、BB四種切法形成的四種片段。（A表示HindⅢ，B表示BamHⅠ）

（2）同時被兩種限制酶切割有兩種不同的目的基因，即AB和BA，所以重組質粒有兩種。Bst l與BamHⅠ酶切割的末端一樣，所以同時用這兩種限制酶切割只能形成一種目的基因，所以只能形成一種重組質粒。

（3）質粒要進行復制才能更多的表達出產物，所以重組之后要能復制。

（4）酶具有專一性，對T—DNA的降解酶為DNA水解酶。

（5）生物的細胞表面的受體具有特異性，人類腸上皮細胞沒有昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體。所以該毒素蛋白對人類的風險相對較小。

（6）自然選擇是普遍存在的，純種種植自然選擇會使害蟲抗性基因頻率快速增長。所以混合種植降低害蟲的抗性基因頻率的增長速率。