Question

12．如圖1表示含有目的基因的DNA 片段和部分堿基序列，圖2表示一種質粒的結構和部分堿基序列．現有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．下列敘述正確的是（　　）

• A． 上述4種限制性核酸內切酶中BamHⅠ、MboⅠ切出的粘性末端不相同
• B． BamHⅠ、MboⅠ酶切DNA后加DNA連接酶重新拼接，都能被MboⅠ再次切割
• C． MspⅠ、SmaⅠ切出的兩個末端可以用DNA連接酶相互連接
• D． 最終構建的基因表達載體上會同時含有抗生素A、B抗性基因

Answer 1

分析 分析圖1：圖中DNA片段含有2個限制酶MspⅠ和SmaⅠ切割位點，也含有兩個限制酶BamHⅠ和MboⅠ切割位點．基因D兩側序列為GGATCC，可被限制酶BamHⅠ切割．
分析圖2：質粒含有CCGG序列、GGATCC序列和GATC序列，其中CCGG序列可被限制酶MspⅠ切割，GGATCC序列和GATC序列可被限制酶MboⅠ切割．用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，但沒有破環抗生素B抗性基因，因此含有重組質粒的大腸桿菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A．

解答 解：A、限制酶BamHⅠ和MboⅠ的識別序列分別為G↓GATCC和↓GATC，所以切出的粘性末端相同，都是GATC，A錯誤；
B、BamHⅠ、MboⅠ酶切DNA后加DNA連接酶重新拼接，形成的序列含GATC，所以都能被MboⅠ再次切割，B正確；
C、限制酶MspⅠ、SmaⅠ的識別序列分別為C↓CGG、CCC↓GGG，所以切出的粘性末端不相同，因而不能用DNA連接酶相互連接，C錯誤；
D、用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，但沒有破環抗生素B抗性基因，因此最終構建的基因表達載體上只含抗生素B抗性基因，D錯誤．
故選：B．

點評 本題考查基因工程操作的相關知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點的能力；能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論的能力．