Question

【題目】為獲得高效降低膽固醇的乳酸菌，科研人員作了如下實驗。

（1）取適量發酵酸肉，剪碎并研磨，磨碎后加入__________制成1:10稀釋液，再梯度稀釋到10-6的稀釋液，涂布于添加了CaCO3的乳酸幼苗培養基（MRS培養基）平板上，在__________條件下恒溫靜置培養48小時。挑取具有__________的菌落純化培養，通常使用的劃線工具是__________。示意圖A和B中__________表示的是該方法接種培養后得到的結果。可通過觀察菌落的__________判斷是否達到了純化。

（2）純化后的乳酸菌菌株接種到高膽固醇培養液中培養，一段時間后離心測定__________（填“上清液或沉淀細胞”）中膽固醇的含量，以____________________作為對照，測定菌株降膽固醇的能力，篩選出具有目的菌株。

Answer 1

【答案】 無菌水 無氧 溶鈣圈（或“透明圈”） 接種環 A 形態、大小 上清液 未接種的高膽固醇培養液

【解析】由題意和圖形可知該題考查微生物的分離和純化相關知識，意在考察考生對知識點的識記理解和應用能力。

（1）配制稀釋液應該用無菌水，可以防止外來雜菌的污染，保證培養的菌種的純度。因為培養的是乳酸菌，其是嚴格的厭氧型細菌，所以培養時應在無氧條件下進行培養。乳酸菌能利用CaCO3，所以應挑選具有透明圈的菌落進行純化培養。劃線接種的工具是接種環，該接種方法是在培養基上劃區域，除了首次其余的都是從上次劃線的末端開始，在A和B中A表示的是平板劃線法，B是稀釋涂布平板法。通過觀察菌落的形態、大小來判斷是否達到了純化，如果菌落的形態、大小都基本相同，說明獲得的菌種單一，如果出現了多種，說明沒有達到純化的目的。

（2）因為分離得到的該乳酸菌能高效降低膽固醇，所以接種到高膽固醇培養液中培養離心后要測定的是上清液中膽固醇的含量，以未接種的高膽固醇培養液作為對照，以測定菌株降膽固醇的能力。