Question

【題目】如圖是從酵母菌細胞內獲取某植物需要的某種酶基因的流程，請回答下列問題：

（1）圖中cDNA文庫含有酵母菌的_______基因，①過程提取的DNA需要____________________切割。

（2）為在短時間內大量獲得目的基因，可用_____________擴增的方法，該反應體系的主要成分應包含：擴增緩沖液（含Mg2+）、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA、______________和_______________。

（3）將目的基因導入某雙子葉植物細胞中常用____________________法。

（4）蛋白質工程也被稱為第二代基因工程，其基本途徑是從預期蛋白質功能出發，通過_____和_____，進而確定相對應的脫氧核苷酸序列，據此獲得基因，再經表達、純化獲得蛋白質。

Answer 1

【答案】

（1）部分（1分） 限制性核酸內切酶（2分）

（2）PCR技術（2分） 引物（對） （2分） 熱穩定性DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶） （2分）

（3）農桿菌轉化法（2分）

（4）設計蛋白質的結構（2分） 推測氨基酸序列（2分）

【解析】

（1）基因組文庫包括了該種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含一種生物的部分基因，因此cDNA文庫小于基因組文庫。從酵母菌細胞中提取DNA時，需用到限制性核酸內切酶。（2）PCR技術是一項在生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術，采用該技術能在短時間內獲得大量目的基因。該反應體系的主要成分應包含：擴增緩沖液（含Mg2+）、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA、引物和熱穩定性DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）。

（3）將基因表達載體導入雙子葉植物細胞常用農桿菌轉化法。（4）蛋白質工程的基本途徑是從預期蛋白質功能出發，通過設計蛋白質的結構和推測氨基酸序列，進而確定相對應的脫氧核苷酸序列。