Question

請(qǐng)回答基因工程方面的有關(guān)問(wèn)題：

(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類(lèi)似（如下圖所示）。  圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。

①?gòu)睦碚撋贤茰y(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為   。

②在第    輪循環(huán)產(chǎn)物中開(kāi)始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段。

(2)設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物（只標(biāo)注了部分堿基序列）都不合理（如下圖），請(qǐng)分別說(shuō)明理由。

 ①第1組：引物I和引物Ⅱ局部發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效；  ②第2組：          。

(3) PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因?yàn)?u>                        。

(4)用限制酶EcoRV、Mbol單獨(dú)或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的DNA片段長(zhǎng)度如下圖(1 kb

  即1000個(gè)堿基對(duì))，請(qǐng)?jiān)诖痤}卡的指定位置畫(huà)出質(zhì)粒上EcoRV、Mbol的切割位點(diǎn)。

 

Answer 1

【答案】

(1)①15/16    ②三

  (2)

②引物I’自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效

(3) DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上

(4)見(jiàn)右圖

【解析】略