Question

【題目】果酒是用酵母菌發酵形成的酒，含有水果的風味與酒精，是人類最早學會釀造的酒。請完成下列相關問題：

（1）如圖是人工培養獲得純凈的酵母菌菌種的基本程序。配制培養基時，原料稱量溶解之后，進行分裝包扎并滅菌，常用的滅菌方法是_________________。平板劃線法是常用的接種方法，劃線之前要對接種環進行______________________________________滅菌，原因是_________________。

（2）研究發現具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精發酵菌種，對野生酵母菌進行誘變后通過篩選可以得到具有這些特性的突變菌，誘變及篩選過程如下：

步驟1：野生菌液體培養一段時間后接受紫外線照射誘變處理。

步驟2：制備選擇培養基。在基本培養基的基礎上，要添加______和調低_______加瓊脂后來滅菌，制成固體平板。

步驟3：將紫外線照射后的菌液稀釋涂布于平板。

步驟4：根據________篩選出突變菌。

（3）釀酒過程中，為檢測發酵罐中酵母菌的生長狀況，常要取樣統計分析，并測定pH，判斷取樣先后順序的主要依據是____________。如果檢測到活菌數量適宜但卻不產生酒精，應采取的措施是_______________。

Answer 1

【答案】 高壓蒸汽滅菌法 灼燒 避免接種環上可能存在的微生物污染培養基 高濃度蔗糖（或葡萄糖） pH 是否能在選擇培養基上生長 pH的大小，pH越小取樣時間越靠后 隔絕空氣

【解析】由題文描述可知：該題綜合考查學生對微生物的實驗室培養、以及菌種的分離和果酒的制作等相關知識的識記和理解能力。

(1) 培養基配制的基本流程為：計算→稱量→溶化（包括瓊脂）→調節pH→滅菌→倒平板，其中的“滅菌”常用高壓蒸汽滅菌法。采用平板劃線法接種微生物時，劃線之前要對接種環進行灼燒，其目的是避免接種環上可能存在的微生物污染培養基。

(2) 為了得到具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌，在對野生酵母菌進行誘變后，利用選擇培養基進行篩選時，需先制備選擇培養基，即在基本培養基的基礎上，添加高濃度蔗糖（或葡萄糖）和調低pH加瓊脂后來滅菌，制成固體平板，然后將紫外線照射后的菌液稀釋涂布于平板上。在該平板上，只有具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌才能生長，因此可以根據是否能在選擇培養基上生長來篩選出突變菌。

(3) 在釀酒過程中，發酵罐中酵母菌進行細胞呼吸產生的CO2會導致發酵液的pH減小，而且發酵時間越長，pH減小的幅度越大�？梢�，判斷取樣先后順序的主要依據是pH的大小，pH越小取樣時間越靠后。酵母菌進行無氧呼吸時才產生酒精，據此可知：如果檢測到活菌數量適宜但卻不產生酒精，應采取的措施是隔絕空氣。