Question

豬的基因和人類的基因存在一定的相似度．據報道經特殊處理的豬皮可在人體上存活3周左右，起保護創面免受感染的作用．為了使移植的豬皮存活更長時間，有人設法導入人的相關基因（用P表示），獲得轉基因小白豬．其簡要流程圖如圖所示：

請據圖回答：
（1）過程①中用到的工具酶是

 

，將目的基因導入成纖維細胞常用的方法是

 

．
（2）過程②中，常用

 

酶處理，將皮膚組織塊分三次單個成纖維細胞．在培養成纖維細胞時需要滿足的條件是通氣、適宜的溫度、pH、營養物質以及

 

環境．
（3）過程③中，用

 

處理以獲取更多的卵（母）細胞，其在體外需培養到

 

期再通過顯微操作進行去核處理．
（4）過程中所用的技術是

 

；圖中“早期胚胎”移植到代孕母豬子宮內時通常需要培養到

 

期．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,胚胎移植

專題：

分析：根據圖示，可知①是基因表載體的構建、②是動物細胞培養、③是早期胚胎培養．成纖維細胞是動物細胞，常用顯微注射法將目的基因導入受體細胞．通過核移植技術形成重組細胞，首先對供體用促性腺激素處理，使其超數排卵；另需要將卵母細胞培養到減數第二次分裂中期才可以去核．在進行胚胎移植時，應選擇發育良好、形態正常的桑椹胚或囊胚，此時全能性較高，易于分裂和發育．動物細胞培養基含有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質，另外需要無菌和無毒的環境．

解答： 解：（1）在構建表達載體時，要用同一種限制酶切割質粒和目的基因，使質粒和目的基因產生相同的末端，再用DNA連接酶連接成重組質粒．受體細胞是動物細胞，可以通過顯微注射法將目的基因轉化入受體細胞．
（2）動物細胞培養時，取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織），用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞．動物細胞培養需要在無菌、無毒的環境、營養物質充沛、適宜的溫度和PH、氣體環境等條件．
（3）對供體用促性腺激素處理，使其超數排卵，獲取更多的卵母細胞．去核的卵細胞，需要培養到減數第二次分裂中期才可以去核．
（4）在進行胚胎移植時，應選擇發育良好、形態正常的桑椹胚或囊胚，此時全能性較高，易于分裂和發育．
故答案為：
（1）限制酶和DNA連接酶      顯微注射法
（2）胰蛋白（或膠原蛋白）     無菌、無毒
（3）促性腺激素      減數第二次分裂中（或MⅡ中期）
（4）（早期）胚胎培養     桑椹胚或囊胚

點評：本題綜合考查了細胞工程、胚胎工程和基因工程的相關知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系；理論聯系實際，綜合運用所學知識解決自然界和社會生活中的一些生物學問題的能力．