Question

15．無菌操作是微生物接種技術的關鍵；傳統發酵技術和微生物分離、純化、應用過程及植物組織培養和動物細胞培養過程中，均要無菌操作．回答下列相關問題：
（1）消毒和滅菌是兩個不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠喪失生長繁殖的能力．消毒僅指殺死一部分對人體有害的病原菌而對被消毒的物體基本無害．下列哪些事物適用于消毒處理A．
①皮膚　    ②飲用水　  ③牛奶　  ④注射器　   ⑤培養皿
⑥接種環　  ⑦培養基　  ⑧果汁　  ⑨醬油　     ⑩手術刀
A．①②③⑧⑨B．④⑤⑥⑦⑩C．①②③④⑤⑥⑧D．以上全部
（2）配制培養基時各種成分在溶化后分裝前必須進行調整pH，接種前要進行
高壓蒸汽滅菌，在整個微生物的分離和培養中，一定要注意在無菌條件下進行．
（3）在微生物的實驗室培養中，獲得純凈培養物的關鍵是防止外來雜菌的入侵．如圖是利用平板劃線法進行大腸桿菌接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面．為達到這一目的，操作上應注意：
①每次劃線前要灼燒接種環；
②冷卻后從上一區劃線末端開始劃；
③首尾區不連接（不重疊）．
（4）培養大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養基是否被污染．對固體培養基應采用的檢測方法是將未接種（接種等量無菌水）的培養基在適宜的溫度下放置適當時間，觀察培養基上是否有菌落產生．
（5）有位同學在家制作泡菜時，為避免雜菌污染而向泡菜壇中加入了青霉素，結果發酵失敗，原因可能是青霉素殺死了乳酸菌．

Answer 1

分析 （1）培養基的營養構成：各種培養基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．分為液體培養基和固體培養基．
（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
（3）培養基、培養皿、接種環、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
（4）選擇培養基的原理是：不同微生物在代謝過程中所需要的營養物質和環境不同．有的適于酸性環境，有的適于堿性環境；例如從土壤中分離放線菌時，可在培養基中加入10%的酚數滴，抑制細菌和真菌的生長；如培養酵母菌和霉菌，可在培養基中加入青霉素；培養金黃色葡萄球菌，可在培養基中加入高濃度的食鹽．

解答 解：（1）①②③⑧⑨應采用消毒，④⑤⑥⑦⑩應采用滅菌，故選A．
（2）配制培養基時各種成分在溶化后分裝前必須進行調整pH，培養基接種前要進行高壓蒸汽滅菌，在進行倒平板．
（3）微生物實驗室培養的關鍵在于防止雜菌污染，本題是采用平板劃線法接種，需要注意的是連續劃線時，每次劃線前要灼燒接種環，同時劃線結束首尾不能相連．
（4）檢測培養基是否被污染．對固體培養基應采用的檢測方法是將未接種（接種等量無菌水）的培養基在適宜的溫度下放置適當時間，觀察培養基上是否有菌落產生．
（5）制作泡菜時，為避免雜菌污染而向泡菜壇中加入了青霉素結果發酵失敗，原因可能是青霉素殺死了乳酸菌．
故答案為：
（1）A
（2）pH     高壓蒸汽滅菌
（3）平板劃線      ①灼燒接種環     ③不連接（不重疊）
（4）將未接種（接種等量無菌水）的培養基在適宜的溫度下放置適當時間
（5）青霉素殺死了乳酸菌

點評 本題主要考查微生物的實驗室分離，意在考查考生對相關知識的理解，把握知識間內在聯系的能力．