DNA復(fù)制過程中，保證復(fù)制準(zhǔn)確無誤進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是
A．破壞氫鍵并使DNA雙鏈分開 B．游離核苷酸與母鏈堿基互補(bǔ)配對(duì)
C．配對(duì)的游離核苷酸連接成子鏈 D．子鏈與模板母鏈盤繞成雙螺旋結(jié)構(gòu)
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科目：高中生物 來源： 題型：閱讀理解
圓褐固氮菌是自生固氮菌，為經(jīng)濟(jì)有效地提高農(nóng)作物產(chǎn)量，人們一直在努力研究、尋找固氮基因。對(duì)基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進(jìn)行，PCR技術(shù)有效地解決了這個(gè)問題。如今對(duì)基因的深入研究使人類跨入了蛋白組研究時(shí)代，從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)是該研究要做的基本工作之一。
（1）某同學(xué)在做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí)，不小心把圓褐固氮菌樣品和酵母菌樣品混在一起，已知青霉素會(huì)影響固氮菌的生長(zhǎng)繁殖，但不影響真菌的生長(zhǎng)繁殖。請(qǐng)?zhí)羁胀瓿煞蛛x這兩種菌的主要實(shí)驗(yàn)步驟：
①分別配置 的培養(yǎng)基和 的培養(yǎng)基，分別分成兩份，依次標(biāo)上A、a、B、b備用；
②分別向A、B培養(yǎng)基接種 ；
③把接種后的培養(yǎng)基放在恒溫箱中3d—4d；
④從A、B培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的 中挑取生長(zhǎng)良好的菌株，分別接種到 中；
⑤ 。
（2）用基因工程技術(shù)從經(jīng)過分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因，然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增。下列表1和表2分別表示用PCR擴(kuò)增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。
| PCR反應(yīng)體系 | 50ul |
| 緩沖液 | 5ul |
| 脫氧核苷酸 | 1ul |
| 引物A | 0.5ul |
| 引物B | 0.5ul |
| DNA聚合酶 | 0.5U |
| 模板DNA | 1-2ul |
| 加去離子水補(bǔ)足至50 ul | |
| 反應(yīng)條件 | ||
| 溫度 | 時(shí)間 | |
| 變 性 | 95℃ | 30s |
| 復(fù) 性 | 55℃ | 30s |
| 延 伸 | 72℃ | 1min |
| 30個(gè)循環(huán)后 | 適宜 | 5-10min |
| 保 溫 | 4℃ | 2h |
①?gòu)纳媳碇锌傻贸觯琍CR技術(shù)與DNA復(fù)制相比較，主要區(qū)別之一是 。
此外，從反應(yīng)條件看，所使用的DNA聚合酶應(yīng)具有__________的特點(diǎn)。每次循環(huán)都需要2種引物的主要原因是_______________ ________________。
②下圖為第1輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物。請(qǐng)繪出以a鏈和b鏈為模板經(jīng)PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物。
（3）在對(duì)固氮基因產(chǎn)物的生產(chǎn)研究中，需要從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)。下圖表示蛋白質(zhì)提取和分離實(shí)驗(yàn)涉及的相關(guān)原理。
①圖甲表示相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠色譜法分離的過程。試管中收集到的液體最先出現(xiàn)的是相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)，原因是 。
②圖乙所示實(shí)驗(yàn)?zāi)M電泳現(xiàn)象，U型管左側(cè)的顏色逐漸變深，原因是 。
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