Question

【題目】干擾素基因缺失的個體免疫力嚴重下降。科學家利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失的患者進行基因治療。請回答下列問題：

（1） 胚胎干細胞可由囊胚的_______細胞分離培養獲得，在飼養層細胞上能夠維持_______的狀態。

（2） 利用PCR技術擴增干擾素基因時，需在______________________酶的作用下進行。PCR技術主要利用了______________的原理。

（3） 將經過修飾的腺病毒與干擾素基因重組形成的_______________轉移到ES細胞中，篩選出成功轉移的細胞進行擴增培養。對改造后的ES細胞進行培養的過程中，為了防止污染，可在培養基中添加一定量的___________________。

（4） 有人得到如圖所示的含有目的基因的表達載體，但其不能在宿主細胞中表達目的基因產物，分析目的基因不能表達的原因是__________________。

（5）由于干擾素很難在體外保存，為解決這一問題，可利用蛋白質工程對干擾素進行改造， 基本途徑是：預期蛋白質功能→設計預期蛋白質的結構→推測應有的____________→找到對應的脫氧核苷酸序列。

Answer 1

【答案】內細胞團不分化耐高溫DNA聚合（或Taq或熱穩定DNA聚合）DNA雙鏈復制基因表達載體抗生素目的基因插入在終止子的下游，目的基因不能被轉錄氨基酸序列

【解析】

試題分析：分析（4）題圖，圖示為重組質粒，含有啟動子、終止子、目的基因、復制原點和抗生素抗性基因，由于目的基因插入的部位不在啟動子與終止子之間，所以無法表達。

（1）ES細胞是由早期胚胎（囊胚的內細胞抱團）或原始性腺中分離出來的一類細胞，利用其具有（發育的）全能性，可以將其培養成人體各種組織器官；在飼養層細胞上能夠維持不分化的狀態。

（2）PCR技術利用的原理是DNA雙鏈復制，需要耐高溫的DNA聚合酶的催化。

（3）經過修飾的腺病毒相當于運載體，與干擾素（目的基因）重組，形成基因表達載體。抗生素具有殺菌作用，可以防止雜菌污染。

（4）根據以上分析已知，由于目的基因插入在終止子的下游，目的基因不能被轉錄。

（5）蛋白質工程屬于第二代基因工程，其基本途徑是：預期蛋白質功能→設計預期蛋白質的結構→推測應有的氨基酸序列_→找到對應的脫氧核苷酸序列。