Question

14．尿素是一種重要的農業氮肥，但尿素只有通過土壤中某些細菌分解為氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的細菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統計每克土壤樣品中活菌數目，培養基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根據培養基的成分判斷，該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌？不能（能/不能），原因是培養基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物．
（2）要統計每克土壤樣品中活菌數目，宜采用稀釋涂布平板法接種，根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統計平板上的菌落數目（平均菌落數）就能大約推測出樣品中活菌數．常用的微生物接種方法還有平板劃線法，此接種法在做第二次以及其后的劃線操作時總是從上次劃線的末端開始劃線的原因是將聚集的菌種逐步稀釋分散，從而獲得由一個細胞繁殖而來的菌落．
（3）實驗結束后，使用過的培養基應該進行滅菌處理后，才能倒掉．

Answer 1

分析 1、選擇培養基的概念是：在微生物學中，將允許特定微生物種類生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基，稱為選擇培養基，由于分解尿素的細菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素為唯一氮源的培養基上，分解尿素的菌能以尿素為氮源生長，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而無法生長．
2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養基上，進行培養，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，獲得由單個細胞繁殖而來的菌落．

解答 解：（1）由圖中培養基的配方可知，該培養基中，能提供氮源的是蛋白胨和尿素，不能利用尿素的菌可以以蛋白胨為氮源生長，所以不能分離出分解尿素的菌．
（2）微生物常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，由于圖涂布平板時，可以確定涂布的體積，因此要統計每克土壤樣品中活菌數目，宜采用稀釋涂布平板法進行接種；根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統計平板上的平均菌落數，進而推出出樣品中活菌數．平板劃線法時，第一次灼燒接種環的目的是殺滅雜菌，在做第二次以及其后的劃線操作時總是從上次劃線的末端開始劃線的目的是 將聚集的菌種逐步稀釋分散，從而獲得由一個細胞繁殖而來的菌落．
（3）實驗結束后，為防止培養的微生物污染環境，使用過的培養基應該進行滅菌．
故答案為：
（1）不能　      培養基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物
（2）稀釋涂布平板     菌落數目（平均菌落數）    平板劃線法    將聚集的菌種逐步稀釋分散，從而獲得由一個細胞繁殖而來的菌落
（3）滅菌

點評 本題旨在考查學生對選擇培養基的選擇作用、稀釋涂布平板法和平板劃線法接種微生物、微生物培養的無菌操作等技術的熟練掌握和應用．