Question

【題目】花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。

據(jù)圖回答下列問題：

（1）過程①所需的酶是_________。過程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體_______的存在，這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標(biāo)志。

（2）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是__________________。用于雜種植株的鑒定。

（3）下圖是用該引物對雙親及再生植株 1—4 進行PCR擴增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株 1—4 中一定是雜種植株的有_________。

（4）對雜種植株進行_____接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株。

（5）培育抗黑腐病雜種植株的技術(shù)稱為_____，該技術(shù)中與 PEG 效果相同的誘導(dǎo)法還有______（填兩項），此技術(shù)的最大優(yōu)點是_________。

Answer 1

【答案】 纖維素酶和果膠酶 葉綠體 保持原生質(zhì)體完整性 1、2、4 黑腐病菌 植物體細胞雜交 離心、震動、電擊 打破種間的生殖隔離

【解析】試題分析：分析題圖，圖示為采用植物體細胞雜交技術(shù)獲得抗黑腐病雜種植株的流程圖，其中①表示采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細胞壁的過程；②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過程；之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)即可得到雜種植株。

（1）圖中①表示采用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁的過程；用于融合的兩個細胞，一個是黑芥苗的葉肉細胞，一個是花椰菜的根部細胞，其中供體細胞特有的結(jié)構(gòu)是葉綠體，因此可通過觀察葉綠體的有無作為初步篩選雜種細胞的標(biāo)志。

（2）原生質(zhì)體沒有細胞壁的保護，需要加入適宜濃度的甘露醇以保證滲透壓的穩(wěn)定，以避免原生質(zhì)體吸水或失水破壞原生質(zhì)體的完整性。

（3）根據(jù)圖譜，花椰菜含有堿基對為300和600的DNA片段，黑芥還有堿基對為1000、1300和1500的片段，再生植株3，只含有長度為300和600的片段，與花椰菜一致，1、2、4 既含有花椰菜DNA 片段，又含有黑芥DNA片段，為雜種植株。

（4）對雜種植株接種黑腐病菌，能正常生長的即為具有高抗性的雜種植株。

（5）培育抗黑腐病雜種植株的技術(shù)為植物體細胞雜交技術(shù)，該技術(shù)中與PEG效果相同的誘導(dǎo)法還有離心、震動、電擊物理方法，該技術(shù)的最大優(yōu)點是克服遠緣雜交不親和障礙。